蔗糖酶测试盒_微量法

蔗糖酶测试盒_微量法
测定方法：微量法
产品规格：100管/48样
储存条件：低温保存
注   意 ：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
蔗糖酶（EC 3.2.1.26）是碳水化合物消化吸收的关键酶之一，能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收。

测定原理：
本试剂盒采用3.5－二硝基水杨酸法测定蔗糖酶催化产生的还原糖的含量，由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3.5－二硝基水杨酸与还原糖共热被还原成棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比。此法操作简便、迅速、杂质干扰较小。

所需的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、沸水浴、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体2mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1支 ，4℃保存，用时加入1mL蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存；
试剂三：液体3mL×1瓶，常温保存；




测定步骤：

1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至520nm，蒸馏水调零。
2. 样本测定，（在EP管中依次加入下列试剂）：

试剂名称（μL）	对照管	测定管
试剂一	15	15
蒸馏水	15
样本	30	30
试剂二		15

置于25℃准确水浴10min

试剂三

30

30

混匀， 95℃水浴5min左右（盖紧，防止水分散失），冷却至室温

蒸馏水

210

210

混匀，取200μL至微量石英比色皿或96孔板中测定各管520nm吸光值，ΔA=A测定-A对照，每个测定管需设一个对照管。