- ￥2965
- AXYGEN
- 美国
- SCT-150-A
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 供应商：
麦飞生物
- 现货状态：
现货
- 保修期：
/
- 规格：
500个/包，8包/箱
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文献和实验[实验步骤] (一) 提取质粒 1.将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到试管中，接入含质粒的大肠杆菌，37℃振荡培养过夜。 2.取1.5ml培养物倒入微量离心管中，4000rpm，离心2min。 3.吸去培养液，使细胞沉淀尽可能干燥。 4.将细菌沉淀悬浮于100μl溶液Ⅰ中，充分混匀，室温放置10 min。 5.加200μl溶液Ⅱ(新鲜配制)，混匀内容物，将离心管放冰上5 min。 6.加入150μl
冻、或高速离心后，会发生溶血，此时无法提取外泌体。所以，一定要提前做好血清或者血浆的分离，并且采血后尽快进行分离，期间不能经过冷冻，离心时转速不可太高，离心后取上清即可，发生溶血的样本应丢弃。因血液在凝血过程中血小板受到刺激会产生大量外泌体，因此若需要排除血小板外泌体的影响应采用血浆进行外泌体提取检测。 具体血液样本操作如下: 1）采血时间一般为早晨或上午； a、血浆：将抗凝管收集的全血 2 mL，轻柔上下颠倒混匀； b、血清：收集不加抗凝剂的全血 2 mL，加入到离心管或促凝管中，凝血后进行下一步离心
Buffer R-A，适当匀浆后收集合并到1.5ml 离心管。 （d）用带4～6 号针头的1ml 注射器反复吸注10次。 匀浆充分与否是决定RNA 和DNA 得率的关键。匀浆完全时，溶液不再粘稠，很容易从注射器针头上呈不连续滴状滴落，而非连续状。 2.吸取0.4ml 匀浆液转入另一1.5 ml 离心管中，若匀浆体积不足 0.4ml，加Buffer R-A 补充至0.4ml。 3.加0.15ml Buffer R-E，盖紧离心管，旋涡振荡混合均匀或或用步骤1 中使用的注射器反复吸注2～3次
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