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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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999
- 供应商：
麦飞生物
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现货
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/
- 规格：
500/包，10包/箱
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文献和实验700μl，连续装柱、离心。(注：每柱最多回收25~30μgDNA) d)加入300μlBindingbuffer，室温下，10,000rpm离心10min，弃上清。 e)每管加入700μl的无水乙醇稀释的spwbuffer到柱中，静置3min，室温下，10,000rpm离心1min。 f)弃上清，10,000rpm离心空管1min。 g)转移柱至一个干净的1.5ml离心管中，每管加20μlDNAElutionbuffer，室温下，10,000rpm离心1min。上清夜即为纯化的DNA
-RAD）， PCR仪 My Cycler （Bio-RAD），Direct-Pure UP 超纯水系统（RephiLe），核酸电泳仪 EPS100 (上海天能)。细菌基因组 DNA 提取试剂盒（Axygen），dNTP （Takara）三、试验方法1. 样品制备和增菌培养 接种前，先将增菌培养基煮沸 10 ~ 15 min，以排除溶解于培养基中的氧，并迅速冷却，切勿摇动。每 15 ml 增菌肉汤中接种 1 ~ 2 g 固体食品或 1 ~2 ml 液体食品，接种时将接种物慢慢接入肉汤液面以下。每份样品接种
3.用1000枪将上清转入差速离心专用离心管中（离心管事先用去离子水冲洗）用裂解液配平 4.差速离心33000-35000转（45000g）30min 5.弃上清，沉淀加入150μl左右蛋白保存液（根据沉淀的量调整）用枪来回吹打使沉淀溶解，枪头在液面下，尽量不要出沫 6.将上述液体分装到0.5ml离心管中，每管20-25μl，留一管-20°C保存测浓度，其余放入-80°C保存 二．组织总蛋白 裂解液 40%SDS+60%RIPA+1%蛋白酶抑制剂 1.-80°C冰箱中取出组织放入研磨管中
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