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(PEPC)测试盒_微量法

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  • 晶抗生物
  • JK-R7196
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  • 2025年07月11日
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      上海晶抗生物工程有限公司

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    • 应用

      仅供科研研究使用

    • 检测方法

      微量法

    产品细节图片1


    (PEPC)测试盒_微量法
    测定方法:微量法
    产品规格:100管/96样
    储存条件:低温保存
        意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
    测定意义:
    PEPCEC 4.1.1.31广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中,是催化二氧化碳反应生成草酰乙酸呈不可逆反应的酶,对三羧酸循环的运转起重要调节作用。

    测定原理:
    PEPC催化CO2生成草酰乙酸和HPO42-,苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和NADH生成苹果酸和NAD+,在340nm测定NADH减少速率,计算PEPC活性。

    自备的仪器和用品:
    紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

    试剂的组成和配制:
    提取液:100mL×1瓶,4保存;
    试剂一:液体15 mL×1瓶, 4保存; 
    试剂:粉剂×2-20保存;
    试剂 :原液10μL×1支,4保存;
    试剂:稀释液5mL×1瓶,4保存;


    产品细节图片2

    测定步骤和加样表:
    1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
    2、样本测定
    (1)取试剂二瓶一瓶,加入6mL试剂一和4.2mL蒸馏水充分混匀,置于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴5min;现配现用。
    (2)试剂三工作液的配制:将试剂三原液:试剂三稀释液=1μL:329μL稀释,混匀,用多少配多少。
    (3)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、20μL试剂三、170μL试剂二,混匀,立即记录340nm处20s时的吸光值A1和5min20s后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
     

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