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- 晶抗生物
- JK-R7134
- 国内
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存：
525
- 样本：
来电咨询
- 标记物：
详见说明书
- 适应物种：
来电咨询
- 应用：
仅供科研研究使用
- 检测方法：
微量法
硝酸还原酶(NR)测试盒_微量法
测定方法：微量法
产品规格：100管/96样
储存条件：低温保存
注 意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
NR（ EC 1.7.1.3）广泛存在于植物中，是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶，也是诱导酶，对作物的产量和品质有影响。
测定原理：
NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐，NO3ˉ +NADH+H＋→ NO2ˉ +NAD＋ +H 2 O；产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下，与 α - 萘胺定量生成红色偶氮化合物；生成的红色偶氮化合物在 540 nm 有大吸收峰，可用分光光度法测定。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
诱导剂储备液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体10mL×1瓶，-20℃保存。
试剂二：液体5mL×1瓶，-20℃保存；
试剂三：液体6mL×1瓶，4℃保存（如出现结晶析出，60℃-90℃水浴溶解后使用）；
试剂四：液体6mL×1瓶，4℃保存。
试剂五：标准储备液1mL，-20℃保存。
诱导剂应用液的配制：用时将诱导剂储备液稀释10倍，即取10mL诱导剂储备液加90mL蒸馏水，充分混匀。
0.1umol/mL的标准液的配制：用时将试剂五稀释100倍，即取 0.1ml试剂五加9.9mL蒸馏水，充分混匀。
测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
2、样本测定（在EP管或96孔板中加入下列试剂）
| 试剂名称（μL） | 加样孔 | |||
| 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 | |
| 样本 | 20 | 20 | ||
| 0.1μmol/mL标准液 | 20 | |||
| 蒸馏水 | 75 | 95 | ||
| 试剂一 | 75 | 75 | ||
| 试剂二 | 25 | 25 | 25 | 25 |
| 试剂三 | 50 | 50 | 50 | 50 |
| 试剂四 | 50 | 50 | 50 | 50 |
2、诱导处理后的样本对照管中试剂二改成加25μL蒸馏水。
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文献和实验【原理】硝酸还原酶（NR）是植物氮素同化的关键酶，它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐： 产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸（或对–氨基苯磺酰胺）及α–萘胺（或萘基乙烯二胺）在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下：生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰，可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。一般以Nμg·g﹣1·h﹣1为单位。NR的测定可分为活体法和离体法。活体法步骤简单，适合快速、多组测定。离体法复杂，但重复性较好。【仪器与用具】分光光度计；真空抽气
一、原理硝酸还原酶（NR）是植物氮素同化的关键酶，它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐，产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸（或对–氨基苯磺酰胺）及α–萘胺（或萘基乙烯二胺）在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下：生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰，可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。一般以Nμg·g﹣1·h﹣1为单位。NR的测定可分为活体法和离体法。活体法步骤简单，适合快速、多组测定。离体法复杂，但重复性较好。二、仪器与用具离心机；分光光度计；冰箱
一、原理 硝酸还原酶（NR）是植物氮素同化的关键酶，它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐,产生的亚硝酸盐与对�氨基苯磺酸（或对�氨基苯磺酰胺）及α�萘胺（或萘基乙烯二胺）在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下： 生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰，可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。一般以Nμg・g-1 ・h-1 为单位。NR的测定可分为活体法和离体法。活体法步骤简单，适合快速、多组测定。离体法复杂
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