α-葡萄糖苷酶(α-GC)测试盒_可见分光光度法

α-葡萄糖苷酶(α-GC)测试盒_可见分光光度法
测定方法：可见分光光度法
产品规格：50管/24样    
储存条件：低温保存
注   意 ：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：                           
α-GC(EC 3.2.1.20)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化水解芳基或烃基与糖基之间的α-糖苷键生成葡萄糖，不仅与细胞壁的松弛或加固有关，而且与细胞识别和一些信号分子产生密切相关。

测定原理：
α-GC分解α-D吡喃葡萄糖苷，在400nm有大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算α-GC活性。

自备用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制：
提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入10mL蒸馏水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂二：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体50mL×1瓶，4℃保存。





测定步骤：

1. 分光光度计预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。
2. 加样表

试剂名称（μL）	测定管	对照管
试剂一	400
蒸馏水		400
试剂二	500	500
样本	100	100

充分混匀，放入37℃准确水浴30min后，立即放入95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却后
充分混匀（以保证浓度不变），8000g，4℃，离心5min，取上清液

上清液	500	500
试剂三	1000	1000

充分混匀，室温静置2min后， 400nm处测定吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。