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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 英文名:
pUC57 Simple TA/平端通用克隆载体
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件:
避光低温保存
- 规格:
20T
pUC57 Simple TA/平端通用克隆载体
描述:
pUC57 Simple 通用克隆载体采用了 TOPO 酶连接技术,载体预先偶联上 TOPO 酶,当加入 PCR 扩增产物后,5 min就可以完成连接反应,连接阳性率高。pUC57 Simple 通用克隆载体消除了大部分的常用酶切位点,便于后续亚克隆。该产品适用于 Taq 酶扩增的含“A”尾巴和高保真酶扩增的 PCR 产物的连接,载体含有氨苄青霉素抗性筛选标记。
注意:RTS DH5α 冻干感受态在未溶解状态下,可于-20℃长期保存(>2 年),已经溶解后,请-60℃以下保存(3 个月)。
主要特征
(1)快速连接,快仅需 5min;(2)操作简单,仅需加入载体和片段即可;(3)无需蓝白斑筛选,阳性率高;(4)不包含任何酶切位点,便于后续亚克隆(5)平末端和 A 尾产物通用。
注意:引物不能磷酸化。
以上产品由上海酶联生物提供,包括产品说明书,本司还供应ELISA试剂盒产品、实验原理、操作步骤等产品详细介绍。
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文献和实验回收试剂盒 Axygen 琼脂糖 Biowest DNA ladder Fermentas (2)X基因慢病毒载体的构建 X基因基因由Transheep全基因合成,构建于载体PUC57中。 PUC57-X基因 EcoRI/BamHI酶切结果: 酶切完成后进行胶回收 2. 载体用pCDNA3.1双酶切,酶切体系如下。 20ul酶切
TOPO克隆提供高效的一步法克隆策略,可以定向克隆平端PCR产物到入门载体。平端PCR产物定向克隆的效率>90%,从而简化了筛选。同时不再需要连接酶、PCR后续步骤或者限制性内切酶。目前有两种定向TOPO克隆载体。pENTR/D-TOPO 和pENTR/SD/ D-TOPO(表2和图3)有以下特点: 位于PCR产物插入位点两侧的attL重组位点可以与Gateway目的载体进行有效重组 通用M13位点便于测序 基于pUC的ori位点提供高产量质粒 大肠杆菌中卡那霉素(kanamycin
商品化的T载体有很多。本实验采用TaKaRa公司的pMDTM18-T Simple Vector。这个载体以pUC19载体为基础,消除了pUC18载体上的多克隆酶切位点,经EcoRⅤ酶切后在两侧的3'端添上“T”制备而成(见附录1)。由于本载体上消除了多克隆酶切位点,克隆后的PCR产物将无法使用载体上的限制酶切下,需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。 【试剂与器材】










