- ￥2000 - 5000
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM0300270
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
一年
- 英文名：
/
- 库存：
10~100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
25T/50T
| 规格： | 25T | 产品价格： | ￥2000.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50T | 产品价格： | ￥5000.0 |
温州科淼生物科技有限公司(Whenzhou KeMiao Biological Technology Co.,Ltd)是一家专业从事“产品研发生产，市场销售，技术服务”为一体的高科技生物技术公司，致力于为科研实验服务，主要产品为试剂盒、抗体、蛋白、相关溶液等其他相关试剂。
PCR技术定义
聚合酶链反应技术（Polymerase chain raction ,PCR）是一种在体外扩增特定DNA片段的方法，具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点，可用很短时间使目的基因或某一片段扩增十万乃至几百万倍。
检测原理
PCR（Polymerase chain raction ），又称聚合酶链反应技术，是一种类似于DNA的 天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：
①模板DNA的变性：模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
②模板DNA与引 物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
③引物的延伸：DNA模板--引物结合 物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需 2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。到达平台期(Plateau)所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。
试剂盒组成
| 名称 | 50T配置 | 保存 |
|---|---|---|
| 2×Probe qPCR MagicMix | 500μL | -20℃ |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL | -20℃ |
| 探针法 qPCR 引物-探针混合液 | 150μL | -20℃ |
| qPCR 阳性 对照(1×10E7 拷贝/μL) | 50μL | -20℃ |
| 说明书 | 50μL | / |
试验所需自备物品
样品DNA或RNA
操作步骤
1.稀释阳性对照制备标准曲线样品
2.制备样品DNA或RNA(可以用自选方法纯化样品的DNA或RNA，也可以咨询客服推荐)
3按照说明书制备Probe qPCR反应。
PCR程序（三步法）
第一步：94℃变性30s；
第二步（循环30-35次）：94℃变性30s，55-60℃退火30s，72℃延伸24s（时间按照合成速度和长度来计算）；
第三步：72℃终止延伸5-10min。
PCR试剂盒特点
1.操作简单，即开即用，用户只需提供样品模板；
2.专一性好，特异性强；
3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品；
4.一管式闭管操作，降低了交叉污染；
备注：1.本公司提供各类指标的PRC试剂盒，包括染料法和探针法，另提供相关试剂。
2.需详细说明书请联系客服。
联系方式如下：
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联系电话：13997448220(同微信) QQ：1750215841
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文献和实验做 real-time PCR之前，你应该如何着手设计引物？做哪些准备？看完必会！
过，你要先确定你选择哪个方法。如果你想用 Taqman Probe 法，请你选择 primer express 3.0。如果你想用 SYBR 法，我建议你选 primer premier 5.0。 为什么？请往下看。 3）两种引物设计软件之比较。 先说专门为 real-time PCR 定制的 primer express 3.0 。这个软件其实是为 Taqman 探针法设计的，而不适合SYBR染料法。 如果你用探针法，强烈推荐。打开软件就会发现，在方法选择的下拉菜单中
miRNA实时荧光定量PCR 实时荧光定量PCR从1996年美国Applied Biosystems公司推出实时荧光定量PCR技术以来，该技术已经越来越广泛的应用到各类RNA的研究中，成为研究RNA必不可少的实验手段之一。目前比较常用的方法有两种：（1）TaqMan荧光探针法：该方法在特异性探针的两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当探针完整时，荧光基团发光被淬灭基团吸收；在PCR扩增过程中，探针被降解，荧光基团与淬灭基团分离，发出可被检测到的荧光，以此来监测整个
实时荧光定量PCR从1996年美国AppliedBiosystems公司推出实时荧光定量PCR技术以来，该技术已经越来越广泛的应用到各类RNA的研究中，成为研究RNA必不可少的实验手段之一。目前比较常用的方法有两种：（1）TaqMan荧光探针法：该方法在特异性探针的两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当探针完整时，荧光基团发光被淬灭基团吸收；在PCR扩增过程中，探针被降解，荧光基团与淬灭基团分离，发出可被检测到的荧光，以此来监测整个PCR过程。（2）SYBR荧光染料法：该方法
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