脱氧核糖核酸，变性，碎片

类病毒（viroid）

　　 能侵染某些高等植物的非细胞形态病原体。作用类似病毒，但没有蛋白质外壳，是一类较小的核糖核酸（RNA）分子。1971年首先在患马铃薯纺锤块茎病的病薯中发现。这种病原体对RNA酶极为敏感而不被蛋白酶或脱氧核糖核酸（DNA）酶破坏，分子量约为120千道尔顿。对它研究较多的第纳（Theoder Diener）把这类感染因子叫做类病毒，以和病毒区别。在电子显微镜下把变性的马铃薯纺锤块茎病类病毒（PSTV）和双链DNA相比较，推测它是单链环形RNA分子。后来经过序列测定证实，PSTV

DNA提取过程中各种试剂的作用及原理

碱裂解法原理 在pH 12.0 ~ 12.6碱性环境中，细菌的线性大分子量染色体DNA变性分开，而共价闭环的质粒DNA虽然变性但仍处于拓扑缠绕状态。将pH调至中性并有高盐存在及低温的条件下，大部分染色体DNA、大分子量的RNA和蛋白质在去污剂SDS的作用下形成沉淀，而质粒DNA仍然为可溶状态。通过离心，可除去大部分细胞碎片、染色体DNA、RNA及蛋白质，质粒DNA尚在上清中，然后用酚、氯仿抽提进一步纯化质粒DNA。 电泳

qPCR常见问题及其分析

PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡，校正加样误差或者是孔与孔之间的误差，提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系，也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲，real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样，要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间，所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法，最好在PCR扩增程序结束