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- 125-05061
- 北京
- 2025年09月28日
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- 英文名：
Lysyl Endopeptidase®
- 供应商：
北京诺博莱德科技有限公司
125-05061，质谱级赖氨酰肽链内切酶Lysyl Endopeptidase®
125-05061，质谱级赖氨酰肽链内切酶Lysyl Endopeptidase®产品简介：
产品品牌：Wako
产品名称：质谱级赖氨酰肽链内切酶LysylEndopeptidase®
产品货号：125-05061
产品规格：20 ug×5
本产品是质谱分析前处理时常用的蛋白分解酶即赖氨酰肽链内切酶，该酶可以特异性切除赖氨酸基团C末端的多肽，可用于蛋白测序分析和 Lys-X 化合物的酶合成。若同时使用赖氨酰肽链内切酶和胰酶，可更好地切断赖氨酸基团的多肽，增加多肽的数量。产品已按照使用习惯做成小包装，是方便使用的冷冻干燥品。20 μg/支可用于100-200个样品的凝胶内消化。
来源：细菌
外观：冻干粉（包含２ mmol/L Tris-HCl 缓冲液，pH８）
活性：0.03～0.07 AU/vial
分子量：27,000（琼脂糖过滤），30,000（SDS-PAGE）
溶解性：溶于水或缓冲液
稳定性：溶解于 pH 值 5.0-12.0 的 Tris 缓冲液中，可在４℃稳定保存２年；在 pH 值 6.0-11.0、30℃时能稳定保存，但温度超过50℃时不稳定。
最适pH值：9.0~9.5
等电点：6.9~7.0
底物特异性：
可水解底物——Tos-Lys-OMe、Bz-Lys-NH2、Bz-Lys-pNA、Lys-pNA
不可水解底物——Bz-Arg-NH2、Bz-Arg-pNA、Arg-pNA
抑制剂：DFP、PMSF、TLCK
◆特点
● 高特异性、高蛋白质消化率、适用于蛋白质谱分析
● 提高裂解效率、增加肽段数量
● 根据使用量特意制备小包装，方便使用
◆应用
分别采用胰蛋白酶（Tp）、赖氨酰肽链内切酶（Lys-C）和 Tp与Lys-C 联用进行胶内酶切的效果比较。
牛血清蛋白 BSA 的条带（100 ng）通过 SDS-PAGE 获得，然后分别用 Tp、Lys-C 和 Lys-C+Tp 进行酶切，再用 MALDI-TOFMS 法进行分析。
这些蛋白酶的实验效果见下表。
表 1：Tp、Lys-C 和 Lys-C+Tp 的结果对照
这些结果表明 Lys-C 酶解的错误裂解率最低。Tp 酶解时加入 Lys-C 后，错误裂解率有所降低，同时，可以鉴定出更多的多肽。
| Tp | Lys-C | Lys-C+Tp | |
| 裂解位点 | 精氨酸和赖氨酸的Ｃ端 | 赖氨酸的Ｃ端 | 精氨酸和赖氨酸的Ｃ端 |
| 错误裂解率 (错误裂解所占比例 ) |
多（８%） | 很少（０%） | 少（３%） |
| 鉴定出的多肽数量 | １７ | １９ | ２２ |
胰蛋白酶（Tp）（图 ａ）和赖氨酰肽链内切酶（Lys-C）+Tp（ 图 ｂ）酶切后的质谱结果对照图。
Lys-C+Tp 酶切后，可以在 m/z=2000 时得到吸收峰，而单独的 Tp 酶切在 m/z=2000 时没有吸收峰。该结果表明 Lys-C 可以提高测序覆盖度。
( 数据由大阪医疗中心和妇婴健康研究所Ｙ. Wada 博士提供 ）
赖氨酰肽链内切酶
赖氨酰肽链内切酶，最初由 Masaki 等人从土壤细菌中分离得到。该酶可以特异性剪切赖氨酸残基Ｃ末端和Ｓ-氨乙基半胱氨酸残基的肽键，用于蛋白测序和 Lys-X 化合物的酶催化合成。该酶稳定性高，在４Ｍ尿素或 0.1% SDS 溶液中 30℃ 孵育６小时之后，仍然拥有完整的生物活性。
| 外观 | 冻干粉（包含ca. 10% Tris-HCl buffer，pH 8） | 活性 | 见包装 |
| 分子量 | 27,000（凝胶过滤）；30,000 (SDS-PAGE) | 溶解性 | 易溶于水或缓冲液 |
| 最佳pH | 9.0-9.5（酰胺酶的最佳活性 pH） | 等电点 | 6.9-7.0 |
| 抑制剂 | DFP、PMSF、TLCK | 来源 | 细菌 |
| 稳定性 | 溶于pH 值 5.0-12.0 的缓冲液中，可于４℃稳定保存。溶于pH 值 6.0-11.0 的缓冲液中，可于30℃稳 定保存，但是50℃及以上不稳定。 |
||
| 单位定义 | 一单位酰胺酶（AU）指在30℃ pH 9.5 时每分钟产生１ μmol 对xiao基苯胺所需的酶量。 | ||
| 底物特异性 | 水解底物：Tos-Lys-Ome、Bz-Lys-NH2、Bz-Lys-pNA、Lys-pNA | ||
| 非水解底物：Bz-Arg-NH2、Bz-Arg-pNa、Arg-pNA | |||
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 125-05061 | Lysyl Endopeptidase®, MS Grade 赖氨酰肽链内切酶，MS级 |
20 μg×5 | 质谱级 |
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125-05061，质谱级赖氨酰肽链内切酶Lysyl Endopeptidase®
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