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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
NM4-64神经元荧光探针
- 供应商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1mg
储存条件:-20℃,避光防潮密闭干燥
产品简介:
神经末梢探针是一系列阳离子型苯乙烯基荧光染料,用于跟踪神经肌肉连接或突触的突触活动。这类染料通常具有亲脂性尾部(两个碳链)和带阳离子的高亲水性头部。神经末梢染料被命名为 NerveRed 或NerveGreen 后接一个碳数,表示亲脂性尾巴的长度。NM 染料具有相似的结构,此外,它们在带正电的头部具有醛固定胺。
阳离子苯乙烯基染料是通过活性依赖性染色突触小泡来发挥功能。染料与细胞或组织共孵育时,染料的水相部分没有荧光,而染料的亲脂性尾部插入细胞膜并呈现强荧光。神经刺激后,在进行胞吞作用时,染料被包裹在囊泡内,因此,洗去细胞表面附着的染料后,荧光信号强弱表示新形成的囊泡的数量的多少。
反之,在胞吐作用时,染料与神经递质一起从囊泡释放,导致荧光信号减少。因此,荧光强度的变化反映了胞吞/胞吐或突触活动的情况。内吞过程中荧光增加的速率——“结合速率”和胞吐过程中荧光减少的速率——“解离速率”因染料种类而异。通常,具有较长亲脂性尾部和更多双键的染料对膜具有较高的亲和力,
因此具有较高的结合速率和较低的解离速率。
本产品等同于 AM4-64,NM4-64 染料能用于固定细胞染色。
操作说明(仅供参考)
以下是在盖玻片上对培养的神经元细胞的神经末梢染色,然后进行固定和免疫染色的方案。
神经末梢染料也可用于标记非神经元细胞类型的内吞囊泡。染色可以在 4℃进行以选择性标记质膜;在室温或 37℃下,染料的内吞通常在 10 min 内发生。可以使用台氏液液或其它缓冲液,可选择性添加钠离子通道阻断剂(TTX),其目的是阻断动作电位并防止染色后的突触囊泡释放。用于特定实验的最佳方案需要由实验者摸索。
1. 在 50 mM 台氏液中稀释神经末梢染料至最终浓度为 4 μM。在室温下将含有细胞的盖玻片置于该溶液中 1 min,使细胞完全浸没。2. 将盖玻片转移至台氏液 + 0.5 μM (TTX)溶液中,室温下孵育 1 min。
3. 室温下,用台氏液 + 0.5 μM TTX 溶液反复多次洗涤盖玻片。
4. 固定。将盖玻片用 ,室温固定 20 min。
5. 将盖玻片直接转移至预冷的含 0.01%Triton X-100 的 PBS 中,4℃放置 10 min。
6. 预冷的 PBS 洗三次,每次 1 min。
7. 在含有一抗的 10%的血清/PBS 中,4℃染色 3 h。抗体浓度应该为常规免疫荧光染色的两倍。
8. 预冷的 PBS 洗三次,每次 1 min。
9. 在含有二抗的 2%的血清/PBS 中,4℃染色 40 min。抗体浓度与常规免疫荧光染色的相同即可。
10. 预冷的 PBS 洗三次,每次 1 min。
11. 荧光显微镜下拍照观察。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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