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- 2025年07月11日
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100
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1年
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
常温
- 规格：
50
产品名称：Denhardt胶溶液，50×
规格：100ml
使用说明书：随货寄送
用途：仅供科研实验，不作临床诊断和食品加工等其他用途
优势：现货供应，公司直销，提前预定的客户可获取新批次产品，我司为专营生物试剂的公司，严格按照国家规定和生产标准进行，保质保量，请客户放心购买
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核酸概述：
一、核酸的分类
生物的核酸包括脱氧核糖核酸DNA和核糖核酸RNA两大类；细胞中的RNA包括mRNA、tRNA、rRNA三大类。
二、生物的遗传物质
1.某些病毒以RNA为遗传物质。这些病毒又叫做RNA病毒，所含核酸也只有RNA。如HIV、H1N1、SARS、烟草花叶病毒等。
2.还有某些病毒以DNA为遗传物质，这些病毒又叫做DNA病毒，所含核酸也只有DNA。如T2噬菌体等。
3.以细胞为结构和功能基本单位的生物，细胞中同时含有DNA和RNA。
包括所有的原核生物、真核生物。这些生物都以DNA为遗传物质，而不以RNA为遗传物质。
三、核酸的分布
1.RNA病毒的RNA由核衣壳包裹，不与组蛋白结合成染色体。
2.原核细胞的RNA分布在细胞质基质、核糖体中，不与组蛋白结合成染色体。
3.真核细胞的RNA分布在细胞核、细胞质基质、线粒体、叶绿体、核糖体中，不与组蛋白结合成染色体。
4.DNA病毒的DNA由核衣壳包裹，不与组蛋白结合成染色体。
5.原核细胞的DNA分布在拟核、质粒中，不与组蛋白结合成染色体。
6.真核细胞的DNA主要分布在细胞核中，与组蛋白结合成染色体。
7.真核细胞的线粒体、叶绿体两种细胞器也具有自己的DNA和RNA。但都不与组蛋白结合成染色体。
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文献和实验将dna固定于尼龙膜上的杂交 denhardt试剂通常配制50×贮存液，过滤后保存于-20℃。可将该贮存液10倍稀释于预杂交液（常为含有0.5%sds和100μg/ml经变性被打断的鲑精dna的6×ssc或6×sspe）中。50×denhardt液中含5g聚蔗糖（ficoll,400型，pharmacia）、5g聚乙烯吡咯烷酮和5g牛血清白蛋白（组分v”sigmal），加水至终体积为500ml
一次。 吸出混合物的液体部分。加入 800 μl 的 1 × SDS 胶加样缓冲液到球珠中，煮沸 4 min。 将样品加入到大孔的不连续 SDS-PAGE 梯度胶中，在 10 mA 的恒定电流下电泳过夜。 通过考马斯蓝染色观察蛋白质泳带。 从胶上切下目标带，将其放到微量离心管中，用 1 ml 50% 乙腈洗两次，每次 3 min。 用胰蛋白酶消化胶中的蛋白质，再将肽电洗脱。 通过窄孔高效液相色谱分离肽。将收集的肽在 ABI 477A 或 494A 机器上进行自动 Edman
入20.9g MOPs，放在磁力搅拌器上溶解。再加1.86g EDTA二水二钠，放在磁力搅拌器上溶解。用1M灭过菌的NaOH 调PH至7.0（约用NaOH 40ml），用DEPC 处理过的去离子水定容至500ml，装入棕色瓶中，写好标签，室温避光保存。4、5 × 甲醛变性胶加样缓冲液（5×loading buffer）： 配制10ml。预先配制水饱和的溴酚蓝溶液：在1.5ml 离心管中加入约0.1mg溴酚蓝，加入1ml DEPC水溶解，充分振荡溶解，离心，可见离心管底部有溴酚蓝粉末剩余，上层液体
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