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1年
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优利科(上海)生命科学有限公司
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常温
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50
产品名称:柱式DNAback
规格:50次
使用说明书:随货寄送
用途:仅供科研实验,不作临床诊断和食品加工等其他用途
优势:现货供应,公司直销,提前预定的客户可获取新批次产品,我司为专营生物试剂的公司,严格按照国家规定和生产标准进行,保质保量,请客户放心购买
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核酸概述:
一、核酸的分类
生物的核酸包括脱氧核糖核酸DNA和核糖核酸RNA两大类;细胞中的RNA包括mRNA、tRNA、rRNA三大类。
二、生物的遗传物质
1.某些病毒以RNA为遗传物质。这些病毒又叫做RNA病毒,所含核酸也只有RNA。如HIV、H1N1、SARS、烟草花叶病毒等。
2.还有某些病毒以DNA为遗传物质,这些病毒又叫做DNA病毒,所含核酸也只有DNA。如T2噬菌体等。
3.以细胞为结构和功能基本单位的生物,细胞中同时含有DNA和RNA。
包括所有的原核生物、真核生物。这些生物都以DNA为遗传物质,而不以RNA为遗传物质。
三、核酸的分布
1.RNA病毒的RNA由核衣壳包裹,不与组蛋白结合成染色体。
2.原核细胞的RNA分布在细胞质基质、核糖体中,不与组蛋白结合成染色体。
3.真核细胞的RNA分布在细胞核、细胞质基质、线粒体、叶绿体、核糖体中,不与组蛋白结合成染色体。
4.DNA病毒的DNA由核衣壳包裹,不与组蛋白结合成染色体。
5.原核细胞的DNA分布在拟核、质粒中,不与组蛋白结合成染色体。
6.真核细胞的DNA主要分布在细胞核中,与组蛋白结合成染色体。
7.真核细胞的线粒体、叶绿体两种细胞器也具有自己的DNA和RNA。但都不与组蛋白结合成染色体。

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文献和实验脏蛋白提取得到蛋白质图谱[1]: 图 1:从小鼠脾脏和肝脏中使用不同方法提取总蛋白的蛋白图谱 条带 1 为柱式法提取的蛋白样品,条带 2 为 RIPA 可溶组分(RIPA 裂解后的上清),条带 3 为 RIPA 不可溶性组分(丢弃的沉淀部分)。实验发现 RIPA 的不可溶组分蛋白质图谱与可溶性组分图谱相似,但是不完全相同。 丢弃的不可溶组分中仍然可检测到许多蛋白条带,覆盖了整个蛋白质图谱分子量范围,不同样品的不可溶组分图谱也各不相同。丢失的蛋白会引起蛋白图谱发生变化,改变不同种类蛋白的比例,且具有
,不同的裂解液配方溶解效率不同,通常使用的 NP-40、RIPA 等裂解液无法将所有蛋白全部溶出(如图 2),已经有研究发现细胞骨架、细胞外基质蛋白及部分膜蛋白、核蛋白等属于难溶蛋白,在提取过程中会形成不可溶沉淀[3]。如果目的蛋白属于这类难溶蛋白,仅使用可溶性组分(上清)用于 WB 实验时,目的蛋白将无法被检测到。针对这种情况,我们可以选择更加有效的裂解液配方,或者使用柱式蛋白提取法来增溶目的蛋白。例如,使用柱式法总蛋白提取法,可有效溶解难溶蛋白,避免不可溶组分的产生,有效解决蛋白丢失问题
在 RIPA 不可溶组分中,如果样品又是研磨困难的组织样品,则优先选择对膜蛋白和小分子量蛋白提取效率更高且不需要匀浆仪的 Invent 柱式法工具进行总蛋白提取[1]。 * 目标蛋白在某个特定细胞器上(内质网,高尔基体,溶酶体,线粒体,内体等)表达,且蛋白表达量较低,若用总蛋白检测时条带较弱,则推荐使用 Invent 柱式法工具富集特定细胞器蛋白后再检测,提高检出效率。 * 研究蛋白定位或研究蛋白转运过程,推荐使用 Invent 柱式法工具进行细胞组分分离,将样品分离为不同组分如分成细胞核,细胞浆,细胞
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