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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
50×Citrate Antigen Retrieval Solution
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
500mL
50×柠檬酸钠抗原修复液
保存:4℃保存,保质期 1 年。
产品内容:

产品说明:
柠檬酸钠抗原修复液(Citrate Antigen Retrieval Solution)是一种最常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻 切片等样品使用、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
细胞或组织用、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。
本抗原修复液采用了广泛使用的柠檬酸钠缓冲液(pH6.0),可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石 蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效 果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试 进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
本产品特别适合用于石蜡切片,也可以用于冰冻切片等其它样品。
本抗原修复液使用前必须用重蒸水或 Milli-Q 水稀释 50 倍,配制成抗原修复液(1X)
操作步骤:
1. 对于石蜡切片:
a. 脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡 5 分钟,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡 3 次。无水乙醇 5分钟,两次。90%乙醇 5 分钟,两次,70%乙醇 5 分钟,一次。蒸馏水 5 分钟,两次。
b. 抗原修复:将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100ºC 加热约 20 分钟(加热时间可以控制在 10-30分钟内,最佳的加热时间 需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95-100ºC。加热可以使用普通的水浴锅,也可 以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 分钟内冷却至室温。用 免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次,每次 3-5 分钟。
随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2. 对于冰冻切片: 用免疫染色洗涤液洗涤切片 5 分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100ºC加热约 20 分钟(加热时间可以控制在 10-30 分钟 内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到 95-100ºC。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次,每次 3-5 分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
3. 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验一、SP 法 1)脱蜡、水化;2)PBS 洗 2~3 次各 5 分钟;3)3% H2O2(80% 甲醇)滴加在 TMA 上,室温静置 10 分钟;4)PBS 洗 2~3 次各 5 分钟;5)抗原修复;6)PBS 洗 2~3 次各5分钟;7)滴加正常山羊血清封闭液,室温 20 分钟。甩去多余液体。8)滴加Ⅰ抗 50μl,室温静置 1 小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9)4℃ 过夜后需在37℃复温45分钟。10)PBS 洗 3 次各 5 分钟;11)滴加 Ⅱ 抗 40~50 μl,室温
实验流程:多靶点免疫荧光染色的实验操作与普通单标记免疫组化流程相似。试剂盒中的荧光染料可以在HRP酶的作用下将信号共价结合到抗原上,随后即可衔接下一轮单标染色,直至全部标记完成,即可复染DAPI后封片观察。1.脱蜡水合:1)新鲜二甲苯浸片10min,重复3次。2)梯度乙醇浸片,100% 5min;95% 5min;70% 2min。3)灭菌水洗片1min,重复3次。4)10%中性福尔马林浸片10min,灭菌水洗片1min,重复3次。2.微波修复:1)将脱蜡水合后的玻片置于修复杯中,用抗原修复液
免疫荧光实验步骤 脱蜡至水 二甲苯Ⅰ(8min) 二甲苯Ⅱ(8min) 无水乙醇和二甲苯1:1(5min) 无水乙醇(3min) 95%乙醇(3min) 85%乙醇(3min) 75%乙醇(3min) PBS洗3遍 二.抗原修复 柠檬酸钠抗原修复液修复。 抗原修复100℃ 20min ;自然冷却至室温。 三.PBST洗2遍,PBS洗1遍。每次5min。 四.用30%H2O2和甲醇配制3%的H2O2溶液。每张切片加1滴,室温下孵育10分钟,以阻断内源性过氧
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










