- ￥618
- 博尔森/BIOESN
- BES21477KB
- 中国
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
Non-denatured PAGE Gel Preparation Kit
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50T
非变性PAGE制胶及电泳试剂盒（常规蛋白）
储存条件：参照产品组成储存条件，保质期1年。
产品组成：
注意：
1. （APS）为结晶性粉末，2-8 ℃储存，使用前每支加入 1 mL 蒸馏水即为 10% APS 溶液，现配现用最佳，溶液用后-20 ℃可储存 2 个月。APS 如出现严重结块，即已变质。
2. 将5×tris-甘氨酸电泳缓冲液（干粉）加入到900mL的蒸馏水中，搅拌溶解之后，定容到1L，即得5×电泳液，常温可保存半年。使用前用蒸馏水稀释到1×。
产品简介：
本试剂盒提供非变性 PAGE 凝胶制备以及电泳全套试剂。可以根据需求配制各种浓度的非变性分离胶，同时提供 4×非变性蛋白上样液（需-20℃保存）和 5×非变性电泳缓冲液用以满足不同分子量的酸性蛋白电泳实验，无需再准备试剂，使用方便，经济实惠。如需小量制备多种浓度变性分离胶请选购 SK6010 产品。
操作步骤：（以 0.75mm 厚 mini 胶为例）
一、灌制分离胶
1．参照凝胶模具说明书，装配好模具。
2．取相应体积的 30% Acr-Bis（29:1）、分离胶缓冲液和双蒸水（参照表 1）在小烧杯或试管中混合。
3．加入 10% APS 溶液和 TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
4．注入模具（留少许以判断凝胶状态），避免产生气泡，凝胶混合液加至距前玻璃板顶端约 1.5 cm 或距梳齿
0.5 cm，轻轻加入 1 mL 水覆盖封胶，使分离胶表面保持平整。
5．静置 30-60 分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，表面凝胶已聚合。
二、灌制浓缩胶
1．倒掉覆盖在分离胶上的水层。
2．将相应体积的 30% Acr-Bis（29:1）、浓缩胶缓冲液和双蒸水（参照表 2）在一个小烧杯或试管中混合。
3．加入 10% APS 和 TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
4．将浓缩胶溶液加至分离胶的上面（留少许以判断凝胶状态，避免产生气泡，直至前玻璃板的顶端。
5．将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
6．静置 30-60 分钟，待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，避免破坏加样孔。
7．进行常规电泳操作。使用 Tris 甘氨酸电泳液建议电泳条件：初始电压 80V，约 30 分钟，样品进入分离胶后，电压调至 120V，约 1 小时，样品抵达凝胶底部停止电泳。
注意事项：
1. APS 溶液常温不稳定，取用后立即放回-20 ℃冰箱；若发现凝胶时间延长，应更换 APS 溶液。
2. PAGE 凝胶的凝聚速度与温度以及 APS、TEMED 的用量密切相关；可通过增加 50%-100% 的 APS 及 TEMED的用量，加快 PAGE 凝胶的聚合速度，但凝胶聚合过快不利于操作。
3. 在凝胶配制过程中，尤其是液体混匀步骤，应尽量避免气泡的产生。
4. 在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作，加水时速度不能太快。
5. 具有神经毒性，操作时请穿戴实验服和一次性手套。
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文献和实验通常跑胶分为跑琼脂糖胶和 SDS-PAGE 胶，当然也还有非变性胶，这里主要说明上面两种。琼脂糖凝胶电泳一、原理琼脂糖是 D - 和 L - 半乳糖残基通过糖苷键交替构成的线状聚合物，且琼脂糖凝胶具有三维网络结构，物质分子通过时会受到阻力，不同的大小的带电物质在电场下涌动时受到的阻力不同，因此在凝胶电泳中，带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量，而且还取决于分子大小，这就大大提高了分辨能力。一般用于分离核酸分子，同时不同构象的核酸的迁移速率也不一样，超螺旋环状＞切口环状＞线状。不同浓度的胶
Nucleoprotein Protein Extraction Kit 产品说明：本试剂盒提供独特的组份，采用特殊的非离子型去污剂，以及焦磷酸钠等数种蛋白磷酸酶和蛋白酶抑制试剂，能够在非变性和低渗的条件下裂解细胞，经过洗涤去除大部分胞质蛋白和膜蛋白，释放的细胞核能够保持完整，再用Lysis Buffer对细胞核蛋白质进行抽提的同时可以保持核蛋白质的活性，因此该产品可合适用于SDS-PAGE电泳、Western Blot、免疫共沉淀，EMSA，Pull Down, 转录调控等后续蛋白质或分子生物学相关实验
蛋白质印迹（Western blotting）方法原理和优化
流速。所以在结合前先通过预过滤或离心除去颗粒，只将上清加到膜上。而粘性样品要用缓冲液稀释。 Western印迹 Western印迹含一系列步骤，包括： z 用聚丙烯酰胺凝胶分离蛋白样品。 z 将胶上的蛋白转移到膜上。 z 鉴定膜上特定蛋白。 下面将从理论和实践方面讨论Western印迹方法。 用1-D或2-D凝胶分离复杂蛋白质混合物 印迹前分离复杂蛋白质混合物的最常见方法是一维（1-D）SDS-PAGE电泳，它根据蛋白质的分子量进行分离。有时用非变性
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