- ￥268 - 618
- 博尔森/BIOESN
- BES21164KB
- 中国
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
DNase I Solution
- 保质期：
2 年
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
200U /1000U
| 规格： | 200U | 产品价格： | ￥268.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 1000U | 产品价格： | ￥618.0 |
DNase I溶液（1kU/mL, RNase free）
规格：1mL（200U/1000U）
保存条件：-20 度保存，有效期 2 年。
产品简介：
酶贮存液：50 mM Tris-HCl, pH7.5 (25 ℃)； 10 mM CaCl2； 50% Glycerol。
10×DNase I Buffer： 100 mM Tris-HCl, pH7.5 (25 ℃) ；25 mM MgCl2； 1mM CaCl2。
组分说明：
使用说明二：用于 RNA 试剂盒（吸附柱法）提取过程中的基因组 DNA 的去除
1. 准备 DNase I 工作液（每个吸附柱需要 50μL 的工作液）。
工作液配置方法：10μL 10×Reation Buffer（with MgCl2）+2μL DNaseⅠ（RNase Free）+88μL DEPC 水。
2. RNA 试剂盒操作步骤选取。常规的 RNA 提取过程为裂解—纯化—上柱—洗涤—洗脱。请在洗涤的前一步插入 DNA 去除步骤。
3. 在未经洗涤的含RNA和基因组 DNA的吸附柱中，加入 50 μL 的 DNase I工作液，37℃孵育 5-10min。
4. 12,000 rmp/min 离心 1min。然后在穿透液中加入 500-700 μL 的去蛋白液或者是洗涤液，混匀后，重新加入此吸附柱中。静置 2min。
5. 接后续洗涤洗脱步骤。
附加资料：RNA 纯化方法
方法一：酚氯仿纯化
1. 将需要纯化的 RNA 样品，DEPC 水补足到 100μL。
2． 加入 100μL 的水饱和酚-氯仿-（25:24:1）混合液，震荡混匀。
3． 12,000 rmp/min 离心 1min。取上清加入 50μL 的氯仿醇混合液，震荡混匀。
4. 12,000 rmp/min 离心 1min。取上清。
5. 加入 10μL 的 3M 乙酸钠，250μL 预冷乙醇，冰上放置 10min。
6. 4℃，12,000 rmp/min 离心 15min，弃上清。
7. 加入 70%预冷乙醇洗涤管壁，4℃，12,000 rmp/min 离心 15min，弃上清。
8. 沉淀干燥。
9. DEPC 水溶解沉淀。
方法二：吸附柱纯化
1. 将需要纯化的 RNA 样品，加入等体积的异丙醇颠倒混匀。
2． 将上述样品加入到吸附柱中间，室温静置 2min。
3． 12,000 rmp/min 离心 1min。
4． 在吸附柱中加入 200μL 的 75%的乙醇，12,000 rmp/min 离心 1min，弃穿透液。
5. 将吸附柱空甩 30s。
6. 在吸附柱中间加入 50μL 的 DEPC 水，室温静置 3min（需要将套管换成 RNase-free 的离心管）。
7. 12,000 rmp/min 离心 1min，穿透液即为 RNA。
注意事项
1. 因为 DNase I 经常用于需要保持 RNA 完整性的 DNA 消化实验，所以在酶制备过程中最大限度的避免了 RNase 污染，可以安全地用于 RNA 的提取，该酶中含 RNase 抑制剂，无需补加。
2. DNase I 受剪切力的影响比较大，使用前可以将离心管上下颠倒混匀，避免涡旋震荡。
3. 每处理 1μg RNA，DNase I 用量不要超过 1U。
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文献和实验Ribonuclease A (RNase A), DNase-free
FeatureThe RNase A is free of DNase activity. It is not necessary to heat it before use.DescriptionThe Ribonuclease A (RNase A) is an endoribonuclease that specifically degrades single-stranded RNA at C and U residues. It cleaves the phosphodiester
Preparation of RNase-Free DNase by Alkylation
Characterization of RNA molecules by electrophoresis or hybridization frequently requires nucleic acid concentrations over 1 mg/mL. High molecular weight DNA in a mixture of nucleic acids limits the solubility and interferes
,000 x G for 1 minute 2) For each HiBind® RNA Minicolumn, prepare the DNase I digestion reaction mix as follows: OBI DNase I Digestion Buffer 73.5ul RNase-free DNase I (20 Kunitz unites/ul) 1.5ul Total volume 75ul
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