BY2 培养基基盐（含维生素 ）(烟草悬浮细胞)

生化检测常见样本收集及处理方法

弃培养液，用PBS（0.01 M，pH 7.4）将细胞洗一遍，然后收集细胞（贴壁细胞的收集方式常见的有2种：胰蛋白酶处理和细胞刮收集细胞，生化实验一般建议用细胞刮收集贴壁细胞），加入2-5 mL PBS（0.01 M，pH 7.4），制成细胞悬液，之后处理方法见悬浮细胞。 注意事项： 匀浆介质：一般采用PBS（0.01 M，pH 7.4）或生理盐水（0.9% NaCl） 匀浆方式：手动匀浆、机械匀浆、超声破碎、反复冻融 手动匀浆：将样本（含匀浆介质）倒入玻璃匀浆管中，匀浆管下端插入盛有冰水混合

细胞增殖和细胞毒性（CCK-8法）原理和经验总结

相比线性范围更宽，灵敏度更高； CCK-8细胞活性检测试剂无需预制，即开即用。 四、实验操作指南 1．96孔板每孔加入细胞100 μL（留2个空白组不加细胞，加入同体积的培养基）。细胞置于37°C的5%CO2细胞培养箱中培养24 h。 注：A、通常细胞增殖实验每孔加入100 μL约含2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100 μL约含5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。 B、培养温度与细胞类型有关，一般哺乳动物细胞建议37°C

最全面的MTT大汇总

药物的介质，而加药组加入不同浓度的药物。8.避免血清干扰。用含15％胎牛血清培养液培养细胞时，高的血清物质会影响试验孔的光吸收值。由于试验本底增加，会试验敏感性。因此，一般选小于10％胎牛血清的培养液进行。在呈色后，尽量吸净培养孔内残余培养液。实验步骤贴壁细胞：1.收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。2.5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板）,加入浓度梯度的药物,原则上，细胞贴壁后即可