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文献和实验【分享】Thermo Scientific 直接PCR(植物、动物、人源组织)
直接PCR方法使PCR可以直接从样本开始,为DNA扩增带来前所未有的便捷。未经DNA纯化而直接使用微量原始样本做模板,为PCR实验节省大量的时间和成本。 优势: 无需进行昂贵又费时的DNA抽提; 样品需求量小; 实验方案简便,手动操作步骤少; 实验时间极短; 已对多种样本类型进行测试; 强劲的热启动DNA聚合酶保证特异性和高产量。 适用于各类植物样本的高效PCR 测试样本:叶片(拟南芥、玉米、水稻、棉花、烟草、葡萄藤) 种子(苹果、胡萝卜、南瓜) 真菌和藓类(稻瘟
PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
重要。为了确保准确进行 DNA 拷贝,请确保选择高保真 DNA 聚合酶。高保真 PCR 酶具有 3'-5’ 核酸外切酶校对活性。当结合错误匹配的碱基对时,DNA 聚合酶停顿,导致合成暂延。合成暂延 允许去除错误匹配的核苷酸并使用正确的核苷酸取代。 保持序列准确的 DNA 聚合酶的绝佳选择是 Invitrogen SuperFi 或 Thermo Scientific Phusion 高保真DNA聚合酶。这两种酶具有高保真度,准确度是 Taq DNA 聚合酶的 300 倍或 52 倍,并且具有很高的产率。 Q
常规片断级的选择指南: 所谓常规级,即回收片段大小介于100bp和10kb之间,在这个范畴内包含了一般的质粒或者克隆片段的回收。主流方法是柱回收试剂盒。1. Qiaquick Gel Extraction Kit品牌:Qiagen回收范围:70bp-10kb特点:高达80%回收率操作快速简单,3步完成70bp-10kb片段的回收提供三色指示剂的电泳上样loading Buffer,方便判断和操作回收产物纯度高,可用于同位素或荧光测序、芯片分析、连接转化、酶切、标记、PCR、显微注射、体外转录
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