- 询价
- 古朵生物
- 进口/国产
- GDDS0045-5
- 2025年07月11日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
1年
- 英文名：
无
- 库存：
1000
- 供应商：
古朵生物
- CAS号：
无
TSA 详细原理是利用酪胺 Tyramide的过氧化物酶反应(酪胺盐在 HRP 催化 H202 下形成共价键结合位点)， 产生大量的酶促产物， 该产物能与周围的蛋白残基(包括色氨酸、 组氨酸和酪氨酸残基)结 合， 这样在抗原-抗体结合部位就有大量的荧光素沉积， 结果使其检测信号得到 10-100 倍增强。 简单 来说， 用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的 HRP （而不是直接偶联荧光素） ， 来催化后续 添加入体系的非活性荧光素。 荧光素在 HRP 和过氧化氢的作用下被活化， 跟临近蛋白的酪氨酸残基 共价偶联， 使得蛋白样品与荧光素稳定结合。 然后微波或煮沸或者水浴等热修复处理， 前一轮非共价 结合的抗体被洗掉， 共价结合的荧光素稳定共价结合在样本切片蛋白上。 再换个一抗来第二轮孵育 ， 周而复始。 等到所有抗体孵育结束， 荧光素都结合好后， 最后去检测结果。 由于每次体系中都只有单 一抗体孵育， 因此无需担心抗体交叉反应， 以及一抗二抗种属匹配问题， 大大减少了实验设计时不同 种属抗体选择匹配的限制。 也就是说， 如果用 TSA 技术， 同一张片子上所有的靶标都可以选用特异性 高的兔单克隆抗体。 搭配同一支抗兔的 HRP 二抗就可以进行实验， 而且信号放大的倍数大大增强。 本公司开发的试剂盒具体酪胺荧光染料为一下其中一种或者多种： TYR-480， TYR-520， TYR-570 ， TYR-620， TYR-690， TYR-780。 此试剂盒中的荧光染料可单独或配合使用。 可以实现单标、 双标、 三标以及更多重荧光放大/多重同源抗体荧光标记等功能， 极大丰富了此试剂盒的内涵。
试剂盒组成： TYR-520 荧光染料(绿光)(即用型， 5mL),-20℃； TYR-570 荧光染料 （红光） (即用型， 5mL)， -20℃； TYR-620 荧光染料 (即用型， 5mL)， -20℃； TYR-690 荧光染料 (即用型， 5mL)， - 20℃； TSA+增强剂， 100ul， -20℃ （可选） ；高敏多聚 hrp 山羊抗兔二抗 （10mL） 4℃。
备注： TYR-520 荧光染料 、TYR-570 荧光染料、 TYR-620 荧光染料、 TYR-690 荧光染料 在-20 度下， 均为固体， 使用之前需解冻。
TSA+增强剂使用方法： TSA+增强剂能够进一步增强荧光信号放大液的放大信号 5-10 倍， TSA+增 强剂： TYR 荧光放大液=1:500， 使用 TSA+增强剂不是必须的选项， 可以根据具体的情况选择添加 或者不选择添加。
操作流程：
1、 石蜡切片脱蜡至水： 依次将切片放入二甲苯 Ⅰ 15min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇 Ⅰ5min-无水乙醇 Ⅱ。 取出放在通风厨内， 酒精晾干后放入自来水中稍洗， 蒸馏水洗。
2、 抗原修复： 组织切片置于盛满 PH 9.0 EDTA 碱性抗原修复液或者 PH6.0 柠檬酸修复缓冲液的修复 盒中于微波炉内进行抗原修复 （也可以用高压 1-2min 100 度水煮 15min 95 度水浴 20min等其他 热修复方法） 。 中火 8min， 停火 8min， 转中低火 7min， 此过程中应防止缓冲液过度蒸发， 切勿 干片。 自然冷却后将玻片置于 PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次， 每次 5min。 (修复液 和修复条件根据组织类型以及抗原类型来确定） 。
3 、 阻断内源性过氧化物酶： 切片放入 3%过氧化氢溶液， 室温避光孵育 15 min， 将玻片置于 PBS （PH7.4） 中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次， 每次 5min。
4、 BSA 封闭:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈 （防止抗体流走） ， 在圈内滴加用 3%BSA-PBS （或者其他封闭液） 均匀覆盖组织， 室温封闭 30min。
5、 加一抗： 轻轻甩掉封闭液， 在切片上滴加用抗体稀释液稀释好的的一抗 X， 切片平放于避光湿盒 内 4°C 孵育过夜或者 37 度 1-2h。 （湿盒内加少量水防止抗体蒸发）
6、 加 hrp 二抗： 玻片置于 PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次， 每次 5min。 切片稍甩干后 在圈内滴加与一抗相应种属的hrp二抗覆盖组织， 避光室温孵育 50min， PBS 洗三次。
7、 荧光染料反应： TYRXXX 荧光染料反应 10-15min， PBS 洗三次。
8、 重复 2-7 步骤 （换用另外一种 TYRXXX 荧光染料）
9、 DAPI 复染细胞核： 玻片置于 PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次， 每次 5min。 切片稍 甩干后在圈内滴加 DAPI 染液， 避光室温孵育 10min。
10、 封片： 玻片置于 PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次， 每次 5min。 切片稍甩干后用抗 荧光淬灭封片剂封片。
11、 镜检拍照： 切片于荧光显微镜/共聚焦/多通道荧光扫描仪/多光谱成像系统下观察并采集图 像。
染料 激发波长 发射波长
DAPI 蓝色 350 420
TYR-480 450 480
TYR-520 绿色 490 520
TYR-570 红色 550 570
TYR-620 590 620
TYR-690 630 690
TYR-780 750 780
文章引用试剂盒/方法： Co-staining of A, B ， C and D was performed using a Five-color Fluorescence kit ( GuduoBio Biological Technology, Shanghai, China) based on the tyramide signal amplification (TSA) technology according to the manufacture’s instruction.
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验化学显色法，SpotlLight化学发光法的灵敏度要高的多，信号更清晰、干净，而且不会出现一旦显色过度就不可逆转的毛病。5) Clontech Atlas?Glass Fluorescent Labeling Kit： 这是一个间接荧光探针标记试剂盒，标记好的荧光探针适用于各种玻片基质的DNA芯片。在试剂盒提供的dNTP Mix中以氨基化的dUTP（Aminoallyl-dUTP）代替普通的dUTP（这种修饰不影响合成效率），加入2μg以上的样品mRNA或者20μg以上的total RNA，以及基因特异性引物（一般由芯片
生物素标的探针。采用了加强型的化学发光试剂，信号强且发光信号可以持续6小时之久，通常压片5-10分钟，一旦结果不理想，允许反复压片。相比同位素需要压片过夜，SpotLight让你当天就得到实验结果，可谓安全、方便、快速多了；而相比常规化学显色法，SpotlLight化学发光法的灵敏度要高的多，信号更清晰、干净，而且不会出现一旦显色过度就不可逆转的毛病。 5) Clontech Atlas Glass Fluorescent Labeling Kit 这是一个间接荧光探针标记试剂盒，标记好的荧光
SE 活性部分远低于50%（AlexaFluor488微量标记试剂盒产品信息，Invitrogen）。相反，所有Biotium 的CF染料具有相对稳定的胺活性的SE基团型，这比大部分AlexaFluor 染料的SE更耐水解。总体来说，CF染料SE产品一贯的给出更高的标记效率，提供给用户更好的使用价值。选择方案：蓝色（350-450nm处激发） CF 350、Alexa Fluor 350、AMCA等----亮蓝和紫外光激发CF350是类似于Alexa Fluor 350和传统荧光染料AMCA的蓝色荧光
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
