手机验证
询价列表
暂时没有已询价产品
微信扫一扫分享
分享到新浪微博
分享到丁香园论坛
人间充质干细胞高效扩增试剂盒
企业认证
点击 QQ 联系
大量
Human MSCs Robust Expansion Kit
北京百奥创新科技有限公司
低温保存
具体价格请联系我们
人间充质干细胞高效扩增试剂盒 Human MSCs Robust Expansion Kit适用于在体外培养人脐带、脂肪、牙髓等多种组织来源的间充质干细胞。
无异源成分 无菌,无支原体,低内毒素 可支持人脐带血,脂肪,牙髓,胎盘来源间充质干细胞的快速增殖。操作步骤:人间充质干细胞无血清完全培养基的配制:1. 于实验开始时前一天,将培养基添加剂 A 从-20°C 冰箱中取出,置于 4°C 冰箱中直至完全溶解;注意:1)请勿将培养基添加剂 A 从-20°C 冰箱中取出后直接置于 37°C 中;2)培养基添加剂 A 溶解完全后轻轻摇晃瓶身,使其成份均一,摇晃时,请小心避免气泡产生;3)解冻时,若有蛋白沉淀产生属于正常现象,配制成完全培养基后会渐渐溶解,并继续提供营养物质。2.在将培养基瓶拿进超净台之前,用 75%酒精对其表面进行消毒;3.将培养基添加剂 A 和 B 加入到人间充质干细胞基础培养基中;4.吸取基础培养基洗涤瓶身内壁,并重复操作一次,尽可能使培养基添加剂全部加入到基础培养 基中;5.轻轻摇晃基础培养基瓶身,使各成分混合均匀,摇晃时,请避免气泡产生。将配制好的人间充 质干细胞无血清完全培养基置于 2-8°C 保存。人间充质干细胞的复苏:1.准备好 37°C 水浴;2.超净台中,取 5mL 人间充质干细胞无血清完全培养基于 T25 瓶中(可根据实际复苏的细胞量选 择培养容器与培养基体积),并将培养瓶置于 37°C,5% CO2 培养箱中孵育 30min;3.超净台中,取 10mL 人间充质干细胞完全培养基于 15mL 离心管中,待用; 注意:无需将人间充质干细胞无血清完全培养基预先水浴至 37°C,以免影响培养基中生长因子 的活性。4.从液氮中取出冻存的人间充质干细胞,置于-80°C 冰箱中挥发管中液氮,而后迅速将冻存管置于 37°C 温水中,并快速晃动冻存管,使其内含物尽快融化,待冻存管内含物融化完全后取出;注意:1)尽可能将冻存管的内含物全部浸没于 37°C 温水中,使内含物均匀融化;2) 请勿使温水没过冻存管盖的螺口以防污染;3) 细胞复苏的操作过程要迅速,避免影响细胞复苏后的活性。5.在将冻存管拿进超净台之前,用 75%酒精对其表面进行消毒;6.轻轻重悬细胞,并将其移入待用的装有 10mL 人间充质干细胞完全培养基的 15mL 离心管里;7.用 1mL 培养基再次冲洗冻存管,并将此悬液移至离心管中,轻轻吹打混匀;8.室温下,300g 离心 10min;9.倾去上清,往沉淀加入 2-3mL 的人间充质干细胞完全培养基,轻轻吸打均匀;10.从细胞培养箱中取出已预先孵育 30min 的 T25 瓶,吸去培养瓶中的液体;11.将细胞按 0.8-1.0×104 个活细胞/cm2 的密度接种到 T25 瓶中,并加入足量的人间充质干细胞无 血清完全培养基,轻轻摇晃培养瓶,使细胞分布均匀;12.将细胞置于 37°C,5% CO2 的细胞培养箱中培养;13.第二天,更换新鲜的人间充质干细胞无血清完全培养基;14.每隔两天更换一次新鲜的培养基,直至细胞生长至 80-90%的汇合度。人间充质干细胞的传代:1.将 PBS,胰酶置于 37°C 水浴锅中预热;2.超净台中,吸去培养瓶中的培养液;3.轻轻加入 5mL PBS 于 T25 瓶中,轻轻晃动洗涤细胞后吸去 PBS,共洗涤两次;4.加入 2mL 浓度为 0.05%的胰酶,轻轻晃动,使胰酶溶液均匀覆盖培养瓶底面。显微镜下,当 70-80% 的细胞变圆时轻拍培养瓶,并立即加入 10mL 人间充质干细胞无血清完全培养基进行中和。轻轻 吸取瓶内液体反复冲洗瓶底,使细胞完全脱落;注意:建议使用浓度为 0.05%的胰酶,并且消化时间不宜过长,以减少胰酶对干细胞的损伤。5.将细胞悬液转移到 15mL 离心管中,300g 离心 10min;6.小心去除上清,而后加入 10mL PBS 重悬细胞沉淀,并再次 300g 离心 10min;7.小心去除上清,加入 2-3mL 人间充质干细胞无血清完全培养基重悬细胞沉淀,按 1:2 或 1:3 的比例接种到新的 T25 瓶中,再次加入足量的完全培养基,轻轻晃动培养瓶,使细胞分布均匀;8.将细胞置于 37°C,5% CO2 的细胞培养箱中培养。实验数据
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
资料下载:
CT021.pdf 附件下载 (下载 0 次)
请 [登录] 后再下载!
需要更多技术资料 索取更多技术资料
312 人阅读发布时间:2022-04-13 10:38
173 人阅读发布时间:2022-04-13 11:09
218 人阅读发布时间:2022-04-13 11:26
257 人阅读发布时间:2022-04-13 11:36
CT021.pdf 附 (下载 0 次)
马上登录 或注册,即可保存询价历史