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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99999
- 英文名:
RNA-direct qPCR Master Mix
- CAS号:
ISO9001
- 保质期:
有效期见于产品标签
- 供应商:
环凯微生物
- 保存条件:
贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖
- 规格:
500次
产品名称:RNA-direct qPCR预混液
英文名称:RNA-direct qPCR Master Mix
产品编号与包装规格:
| 编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 产品价格 |
| HKE198-01B | RNA-direct qPCR预混液 | 500次(20μl体系) | RNA直接进行qPCR的预混液(RNA-direct qPCR Master Mix) | 4099 |
产品描述:本制品是采用探针法进行一步法 qRT-PCR 的定性、定量反 应专用试剂。在同一体系中,完成从反转录到 qPCR 的全部反应 本制品采用配体修饰的 Tth 酶,通过高温反转录过程,有效消除 了 RNA 高及结构和低温条件下引物非特异性退火对 cDNA 合成 的不利影响,从而增加了反转录的特异性,提高了扩增的效率和 产量。并结合特别配方的反应缓冲夜,可以在较宽的定量区域内 得到良好的标准曲线,准确定量。
产品特点:
同时具有反转录酶活性与聚合酶活性,能够用于一步法检 测。
具有更高的反转录温度 60℃~70℃,反转录的特异性高。
对 PCR 抑制物具有更高的耐受性。
使用建议:使用时请上下颠倒轻轻混合,避免起泡,并经轻微离心后 使用。反应液的配制、分装请使用新的(无污染的)炝头、 Microtube 等,尽量避免污染。
保存温度:-20℃储存。
RNA-direct qPCR Master Mix 产品包装:

RNA-direct qPCR Master Mix 常用反应体系(20μl):

RNA-direct qPCR Master Mix 推荐 PCR 反映程序*:

注意事项:
1)Tth 的反转录温度在 60℃~70℃;反转录时间可以 为 15~30min。
2)该体系更适合于特异性引物进行 RT 反应,并且引 物 Tm 值应为 60℃或更高温度。
3)反应体系中含有 Mn2+,因此,本体系保真度有所 降低,不适合于保真度要求较高的克龙、测序等实验。

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文献和实验的动态范围或线性度最佳,可确保基因表达定量的准确性。 所选试剂在扩增过程中应产生较高且一致的 cDNA 得率,以获得具有高灵敏度和低变异性的基因表达结果。可考虑预混液形式的逆转录酶用以可以减少实验误差。 RT-qPCR 的一个特殊程序是从未经 RNA 分离的粗细胞裂解物直接进行逆转录。在使用稀缺样本或选用群体内特定细胞的实验,可考虑使用直接 RT-qPCR 法来防止可能的样本损失和低 RNA 回收。 cDNA 克隆和文库构建 cDNA 文库可由代表特定样本中转录序列的 cDNA 克隆组成
/L Tris-HCl、pH8.0,0.01mol/L EDTA、pH8.0。 配制方法:按上述各物质终浓度,把各自均配制成十倍浓度的溶液,配制溶液Ⅰ时,取三种十倍溶液各1体积于一容器中,定容至10体积即得溶液Ⅰ。 配制体积 500mL 1000mL (1)葡萄糖(M=198.17): 0.05 mol/L 4.954g 9.909g 10倍: 0.5 mol/L 49.54g 99.09g (2) Tris-HCl(M=121
Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
体系的引物终浓度为 100-400 mM;模板如果是总 RNA 一般是 10ng-500,如果 cDNA,通常情况下是 1 ul或者 1 ul的 10 倍稀释液,要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值,在操作过程中,还需要根据所用 MasterMix,模板和引物的不同进行优化,达到一个最佳反应体系。在反应体系配置过程中,有下面几点需要注意: 1. MasterMix 不要反复冻融,如果经常使用,最好溶解后放在4度。 2. 更多的配制 Mix 进行,减少加样误差。最好能在冰上
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