Exonuclease III

目录号：M007-01A

 

产品描述:

核酸外切酶III能够沿着双链DNA的3'→5'方向逐步切去单核苷酸。每一次的反应只切除最末的几个核苷酸以对双链DNA产生渐进缺失。该酶可以切割双链DNA，产生单链gap，但对单链DNA无活性。通常具有平末端或3'凹陷末端的DNA是最适底物。相反，3'突出末端抗该酶的切割，拮抗程度随3'突出末端的长度而改变，四碱基或更长的突出完全不能被切割。这种特性对于一端是抗性位点（3'突出端）一端是敏感位点（平端或5'突出端）的线性DNA分子，可以产生单向缺失。

另外，与BAL 3 Nuclease相比，本酶的碱基特异性较小，如在富含GC的位置上，由于反应停止的机率较低，可用于DNA的Deletion制作。

本制品是把Exonuclease III基因(E. coli)在大肠杆菌中进行表达后，经多次纯化分离而得到的。

 

产品用途：

1）定点突变；

2）链特异性探针的制备；

3）制备用于双脱氧测序的单链底物。 

 

使用建议：

核酸外切酶III不能切割硫代磷酸的桥连。因此，可以通过引入一个硫代磷酸核苷酸将DNA分子的一端位点保护起来，再创建单向缺失。   

 

保存温度：

-20℃

 

产品包装（A包装）：

产品组成                                                        体积

Exonuclease III（100U/μl）                           30μl

10× ExoIII Reaction Buffer                              1ml 

 

质量保证：

经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带，PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。 

 

活性定义：

在37℃ 30分钟条件下，催化产生1nmol酸溶性总脱氧核糖核苷酸所要求的酶量定义为一个活性单位。 

 

反应条件：

1×反应缓冲液[10mM Bis Tris 丙烷-HCl，10mM MgCl2，1mM DTT（pH 7.0储存于25℃）]，37℃温育。

 

热失活：

70℃，20分钟。

   

参考文献：

Electrochemical DNA sensor based on T-Hg-T pairs and exonuclease III for sensitive detection of Hg²⁺[J]. Xuan Wang et al. Sensors and Actuators B-Chemical. 2021.

A Sensitive Fluorescence “Turn-Off-On” Biosensor for Poly (ADP-ribose) Polymerase-1 Detection Based on Cationic Conjugated Polymer-MnO2 Nanosheets[J]. ShuangshuangWu et al. Sensors and Actuators B: Chemical. 2018.