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pCDNA3.1-ERBB2-3×FLAG质粒

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    • 英文名

      pCDNA3.1-ERBB2-3×FLAG

    • 保质期

      90天

    • 供应商

      优利科(上海)生命科学有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      质粒干粉

    产品细节图片1

    产品名称:pCDNA3.1-ERBB2-3×FLAG质粒
    产品规格:质粒干粉
    有效期:90天,请尽快转化。
    保存温度:一般在-20℃,置于-80℃保存时间更长。
    运输方式:常温运输,1周内。
    应用领域:科研
    生长条件:LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株DH5α,9217bp)
    注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。(请向客服QQ索要质粒信息目录)
    产品细节图片2
    产品细节图片3

    1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min;
    2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10μl 混匀,冰上放置 30min;
    3.热激导入: 42℃静置 90s;
    4.收缩膜孔: 冰浴 2min;
    5.修复培养: 毎管加 800μl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min;
    6.筛选培养: 将适当体积(100 μl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。
    7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。

    pCDNA3.1-ERBB2-3×FLAG质粒培养基:LB+50mcg/ml氨苄青霉素:酵母膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 10.0g,蒸馏水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。灭菌结束后,培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素,浓度50mcg/ml。


    产品细节图片4

     
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    图标文献和实验
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      -MEM、DMEM培养基和M-MLV逆转录酶;小牛血清;G418;DIG High PrimeDNA Labeling and Detection Starter Kit I1。 质粒 pGL3-promoter;含EBVR的质粒p220.2。 重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR的构建 采用StuI和XbaI消化p220.2,获得长4.7 kb的EBVR,包括EBV核抗原1(EBNA1)和OriP,克隆至pGL3-promotor的SV40启动子下游Hind Ill

    • 真核转染

      、SHG-44-重组pcDNA3→5×104/孔接种24孔培养板→24hr后各自用苔盼蓝染色计数细胞→计算细胞生长抑制百分率。③软琼脂克隆形成率分析:SHG-44、SHG-44-vect、SHG-44-重组pcDNA3→104 细胞→0.3%低熔点琼脂糖培养→1-2周后计数不可少于50个细胞的克隆数→计算克隆形成率抑制率。三、注意事项1、优化转染条件(脂质体的用量、DNA密度、细胞密度、脂质体和DNA混合孵育时间)每种细胞和质粒均须进行。用于转染的核酸应高度纯化。为避免微生物污染,所用溶液滤过灭菌

    • 【共享】老外今天把质粒寄来了。

      我5月18号向一位韩国Han-Yang大学的教授索要两个基因的质粒。得住于我们园子里面很多贴子的帮助,在他们的帖子的帮助下,今天(6月2号)老外终于把质粒寄来了。前后仅仅半个月和老外的接触,让我深刻体会到国外专家教授的那种科学无私的精神。把与他来往通信贴出来,供以后需要的朋友参考。也宣传一下这位教授(Sang-Hun Lee MD.PhD)的科学无私精神。 Sent: Sunday, May 18, 2008 12:34 PM Dear Dr Lee, I am working on ×

    图标技术资料

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    质粒使用说明书.doc 附 (下载 0 次)

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