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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
pCEP4-tat
- 保质期:
90天
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
质粒干粉
产品名称:pCEP4-tat质粒
产品规格:质粒干粉
有效期:90天,请尽快转化。
保存温度:一般在-20℃,置于-80℃保存时间更长。
运输方式:常温运输,1周内。
应用领域:科研
生长条件:LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株Stbl3)
注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。(请向客服QQ索要质粒信息目录)


1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min;
2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10μl 混匀,冰上放置 30min;
3.热激导入: 42℃静置 90s;
4.收缩膜孔: 冰浴 2min;
5.修复培养: 毎管加 800μl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min;
6.筛选培养: 将适当体积(100 μl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。
7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。
pCEP4-tat质粒培养基:LB+50mcg/ml氨苄青霉素:酵母膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 10.0g,蒸馏水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。灭菌结束后,培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素,浓度50mcg/ml。
| pET28a-EGFP大肠绿色荧光表达质粒 |
| L4440载体 |
| pLAMP1-mCherry质粒 |
| pGADT7-Rec质粒 |
| pREDKI质粒 |
| pTRE3G质粒 |
| pEnCMV-KRAS WT-3×FLAG质粒 |
| pCMV-HA-Ub质粒 |
| pMDLg-pRRE质粒 |
| pTRIP-SFFV-mtagBFP-2A STING质粒 |
| pgr107质粒 |
| pACT1:Cas9-GFP, U6:sgTK质粒 |
| PL6-CS-WR质粒 |
| pShuttle质粒 |
| pBiT1.1-N [TK-LgBiT]质粒 |
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文献和实验: TCCAAACTCATCAATGTATC pTRC99C-F: TTG CGC CGA CAT CAT AAC pTRC99C-R: CTGCGTTCTGATTTAATCTG pCEP-F: AGA GCT CGT TTA GTG AAC CG EBV-R : GTG GTT TGT CCA AAC TCA TC pIRES2-EGFP.P5’: GTA GGC GTG TAC GGT GGG AG pIRES2-EGFP.P3’: AAC GCA CAC CGG CCT TAT TC 3'AD: AGA TGG
星雪qq 大家好, 我目前需要做转染细胞的实验,我的目的是构建重组蛋白,重组基因已克隆至表达载体pCEP4,目前需要提取质粒做转染,知道要用HEK293细胞,但是查到293细胞有多种,293,293A,293T,不知道到底用哪一种,大家帮忙出出主意吧,谢谢 freecell ATCC上HEK-293,只有一种吧。 woxingwosu HEK293T和HEK293A 均为HEK
[器材和试剂] ● PCR试剂和设备 ● 含有起始scFv的pHENl质粒或单链DNA(ssDNA) ● Wlzard PCR纯化试剂盒(PrOli]egs.) ● PdSEQl引物 ● 定制BACK引物。本实验方案中,该引物是scFvVlBACK引物:5'-AGC GCC GTG TAT TTT TGC GCG CGA CAT GAC GTG GGA TAT TGC-3' ● 用于scFv基因文库限制性消化的试剂和设备 ● BssHⅡ限制性酶(NEB) ●










