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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
65
- 英文名:
pMD2.G
- 保质期:
90天
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
质粒干粉

产品名称:pMD2.G质粒
产品规格:质粒干粉
有效期:90天,请尽快转化。
保存温度:一般在-20℃,置于-80℃保存时间更长。
运输方式:常温运输,1周内。
应用领域:科研
生长条件:LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株Stbl3,5822bp)
注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。(请向客服QQ索要质粒信息目录)


1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min;
2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10μl 混匀,冰上放置 30min;
3.热激导入: 42℃静置 90s;
4.收缩膜孔: 冰浴 2min;
5.修复培养: 毎管加 800μl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min;
6.筛选培养: 将适当体积(100 μl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。
7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。
pMD2.G质粒培养基:LB+50mcg/ml氨苄青霉素:酵母膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 10.0g,蒸馏水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。灭菌结束后,培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素,浓度50mcg/ml。
| pENTR223-LINC00051人源基因质粒 |
| pENTR223-IWS1人源基因质粒 |
| pENTR223-LINC00152人源基因质粒 |
| pENTR223-NBR2人源基因质粒 |
| pENTR223-ZNF706人源基因质粒 |
| pENTR223-NICE-5人源基因质粒 |
| pENTR223-ARL17B人源基因质粒 |
| pENTR223-COX6A2人源基因质粒 |
| pENTR223-MLLT11人源基因质粒 |
| pENTR223-MLLT11-G262C人源基因质粒 |
| pENTR223-FNDC5人源基因质粒 |
| pENTR223-RLN2人源基因质粒 |
| pENTR223-LGALS13人源基因质粒 |
| pENTR223-FMR1人源基因质粒 |
| pENTR223-MS4A1人源基因质粒 |
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文献和实验装进病毒、最终进到靶细胞那段。 pspAX2:包装质粒,表达 gag、pol、rev 等结构蛋白和酶(含整合酶)。pspAX2 是吉凯采用的辅助质粒之一。 pMD2.G:包膜质粒,表达 VSV-G 包膜糖蛋白。VSV-G 具有较广的适用范围,让病毒能感染几乎所有哺乳动物细胞,这也是慢病毒宿主范围宽的原因。 (第四质粒视系统而定,有时 rev 独立表达;部分方案把 rev 并入 pspAX2。) 这几个质粒按比例共转染进 293T 细胞后,gag/pol 负责组装衣壳、rev 负责把未剪接的病毒
sunyuzhu10 包装质粒是pMD2.G pMDLg/pRRE pRSV-Rev 过表达载体是pLVX-IRES-ZsGreen1 这样的四个质粒能包装出慢病毒么? 请有经验的战友帮忙看下 暴君 可以的 644414915 pMD2.G是VSVG吗 我现在正在包病毒,别人给了我这四个质粒,别的什么都没说,我不知道该怎么包装装染 谁有具体步骤 转染质粒
按照TaKaRa的说明书,我用了Cool Start法,就是所有操作和试剂都是放在冰上进行的,据说能够减少非特异性。我当时担心目的基因量不够,所以P了两管,分到四个孔跑胶回收的。胶回收用的是OMEGA的试剂盒。 切胶回收之后测得目的片段浓度大概为20 ng/ul。按照TaKaRa的pMD18T说明书的要求,pMD18T需要加入1 ul,而目的片段需要0.1 pmol-0.3 pmol,换算一下,需要的目的片段的量大概为0.1*1800*325=58500 pg=58.5 ng到0.3*1800
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