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文献和实验相关专题 本文讲述了聚丙烯酰凝胶电泳 (PAGE)技术的一些催化剂的具体介绍以及聚丙烯酰凝胶电泳(PAGE)技术的注意事项。 聚丙烯酰凝胶电泳(PAGE)是根据被分离物质所带来的电的荷多少及其分 子大小、形状的不同，在电场的作用下，产生不同的移动速度而分离的方法。 它具有电泳和分子 筛的双重作用。 1、聚丙烯酰胺 的聚合丙烯酰胺单体和交联剂N1N′-亚甲基双丙烯酰 胺在催化
纸桥浸入缓冲液。于凝胶板负极端分别点样1μl，立即接通电源，在电压梯度约30V/cm，电流强度1～2mA/cm的条件下，电泳约20分钟，关闭电源。(4) 染色与脱色 取下凝胶板，用甲苯胺蓝溶液染色，用水洗去多余的染色液至背景无色为止。四、聚丙烯酰胺凝胶电泳法 1.仪器装置 通常由稳流电泳仪和圆盘或平板电泳槽组成。其电泳室有上、下两槽，每个槽中都有固定的铂电极，铂电极经隔离电线接于电泳仪稳流挡。 2.试剂 (1)溶液A 取三羟甲基氨基甲烷36.6g，四甲基乙二胺0.23ml，加0.1mol/L盐
气泡) 5%积层胶配方(每25ml胶) 积层胶缓冲液 3.5ml, 40%的丙烯酰胺/聚丙烯酰胺混合物 3.125ml,水18.375ml 排处气泡 SDS 0.25ml, 过硫酸铵0.25ml,TEMED 20μl. 7 加入梳子,固定至少30min. 方法-跑胶 1 准备器具,包括冷却循环,用水洗细胞. 2 用1800ml水稀释450ml 5x电泳缓冲液,确保上层缓冲液槽不会渗漏. 3 加入30ul细胞裂解物. 4 加入5ul适当的分子量标记(marker) 5 于浓缩胶在100
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