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- 2025年11月24日
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上海觅拓生物科技有限公司
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现货
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文献和实验H2O 17.5μl × n n = number of reactions。例如：总反应数为40，将1ml 2× TaqMan Universal PCR Master Mix，100μl 10×RNaseP primer/probe mix和700μl H2O混和。震荡后放在冰上。 在预冷的96孔PCR板上完成PCR体系建立。从总管Ⅰ中各取45μl加入到A-D各行的孔中，从总管Ⅱ中各取45μl加入到E-G各行的孔中。 分别取5μl质粒标准
CsCl 1.2 （26.8 g + 92 mL 10 mM Tris-HCl，pH=7.9），再小心加入病毒上清液至体积达到20ml。平衡后，4℃下 23000rpm离心90min （SW28转头），用注射器抽吸下层蓝白色病毒带） 4、病毒透析去盐：配置透析液（10 mM Tris pH 8.0，2 mM MgCl2，5% sucrose），灭菌处理。4℃透析，更换3次透析液，可基本去除CsCl，病毒保存于-80℃。 六、病毒滴度测定（TCID50） 1 、细胞准备：96孔板中接种100μl
为重组缺陷性菌株，可稳定扩增已鉴定的重组质粒），扩增细菌并纯化质粒。 三 重组病毒质粒转导 293 细胞 1 293细胞培养：转导24小时前，以方瓶为例，接种2×106 293细胞于25cm2 方瓶，使生长密度约50-70%。（也可以使用6孔或96孔板） 2 以PacI单酶切重组病毒质粒（转导25cm2 方瓶约需4µgDNA），完全线性化后，乙醇沉淀，再以20 µl ddH2 O溶解。 3 脂质体包裹质粒（以Lipofectamine为例）:每4µ
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