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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
/
- 细胞类型:
细胞系
- 肿瘤类型:
/
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
100
- 英文名:
OP-9
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
永久
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
/
- 是否是肿瘤细胞:
/
- 细胞形态:
成纤维细胞样
- 免疫类型:
/
- 物种来源:
人
- 相关疾病:
/
- 组织来源:
/
- 规格:
1×10⁶cells/T25培养瓶
细胞中文名称:OP9小鼠骨髓基质细胞(带STR鉴定)
| 名称 | OP9 (小鼠骨髓基质细胞) (种属鉴定正确) |
| 别称 | OP-9 |
| 种属 | 小鼠 |
| 年龄(性别) | 胚胎 |
| 组织来源 | 骨髓,基质 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
| 背景描述 | OP9细胞源自新生的op/op小鼠颅盖。因编码M-CSF的基因中的一个突变,OP9细胞不能生成有功能的巨噬细胞克隆刺激因子(M-CSF)。M-CSF的存在对胚胎干细胞(ES)分化成血细胞而不是其他巨噬细胞有抑制功能。OP9细胞可以用于与小鼠胚胎干细胞共培养以诱导胚胎干细胞分化成成红血球来源的、骨髓来源的和B细胞谱系的血细胞。与OP9细胞共培养不需要外源的生长因子或复杂的胚胎结构,这个系统对研究造血细胞的发育和分化的分子机理有用。 |
| 生长培养基 | MEMα+20% FBS+1% P/S |
| 推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
| 推荐换液频率 | 2~3次/周 |
| 倍增时间 | ~26小时 |
| 冻存条件 | 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮 |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃ |
| 保藏机构 | ATCC; CRL-2749 |


1、 细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃, 5%CO2 细胞
培养箱中培养;
2、 细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2 培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(FBS: DMSO=9 : 1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜, 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃, 5%CO2 细胞培养箱中培养


OP9小鼠骨髓基质细胞(带STR鉴定)收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,悬浮细胞需离心处理,加入6ml新鲜完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤说明书。
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……,这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁,要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
性,因此较适合于作为遗传学DNA分子标记,目前STR分析已广泛应用于遗传制图、性状连锁性分析、亲子鉴定、疾病基因定位和物种多态性研究等诸多领域。 1985年,Mullis发明了聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR), 使DNA的体外复制变成了现实。1988年,Saiki 等将耐热DNA聚合酶引入PCR,提高了扩增反应的特异性和效率,简化了操作程序,并实现了DNA扩增的自动化,迅速的推动了PCR技术的应用和普及。PCR能够在体外快速、特异
趁年轻,动起来:Nature 报道运动促进骨髓产生免疫细胞,但这种能力随年龄增长而消失
很难想象骨髓其实可算是人体最拥挤的部位,约占人体体重的 4%-6%,其中多种干细胞和祖源细胞并存,其中就包括免疫细胞的祖细胞。 这些细胞都是处在一定的支持环境中,由周围细胞产生特异性的保护性环境,又称为微环境(niche)。 然而,骨髓中组成微环境的基质细胞(stromal cells)与免疫细胞的早期祖源细胞间的相互作用很大程度上仍是未知。 洞悉这种相互作用是通过何种方式协调的,对于人们理解认识免疫祖源细胞的产生至关重要,将为提高人体免疫力,更好地利用免疫系统提供基础。 2021 年 2 月




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