15ml离心管带穿刺孔

类器官培养与应用——血管类器官

%、且大部分无分化的状态时，吸出培养基。 3、向 hPSCs 中加入 0.5 mM EDTA 洗涤细胞一次。 4、吸去 EDTA 溶液，每孔加入 0.6ml Accutase，并将培养皿放置在 37℃ 解离约 3-5min，直到所有的细胞变圆。 5、向每个孔中加入 5ml 的 hPSCs 培养基，并用 0.1% 台盼蓝进行染色计数。 6、将所有细胞转移至 15ml 离心管中，室温下 300g 离心 3min，收集沉淀细胞。6 孔板中每孔接种 2×105 个细胞，加入预热的 3ml hPSCs 培养

类器官培养与应用——卵巢癌类器官

条件下 220g 离心 5min。 19、将类器官沉淀重悬于 700μl 预冷的 DMEM / F12中，使用移液器吹打数次，机械地破坏类器官。 20、将所得细胞悬液重复 8-12 步骤，完成传代。   类器官冻存 21、取 1-4 个孔的类器官，消化离心后取细胞沉淀，加入 1ml 细胞冻存液。 22、将细胞重悬后转移至冻存管中，利用程序降温盒缓慢降温至 -80℃。 23、第二天，将样品转移到液氮中长期储存。   类器官复苏 24、将液氮冻存的 OC 类器官放置在 37℃ 水浴锅中进行解冻，水浴

类器官培养与应用——结直肠类器官

清洗后，再次 4℃ 条件下 300g 离心 5min。 17、将所得沉淀按照 1:3-1:5 的比例重复 10-13 步骤（具体比例通过类器官的汇合度确定），完成传代。   类器官冻存 18、取 1-2 个孔的类器官，消化离心后取细胞沉淀，加入 1ml 细胞冻存液。 19、将细胞重悬后转移至冻存管中，利用程序降温盒缓慢降温至 -80℃。 20、第二天，将样品转移到液氮中长期储存。   类器官复苏 21、将液氮冻存的 CRC 类器官放置在 37℃ 水浴锅中进行解冻，水浴时间不宜超过 2min。 22