- ￥1486
- 近岸蛋白(Novoprotein)
- E379-02A
- 中国
- 2025年10月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
NLS-Cas9-EGFP Nuclease（5ug/ul）
- 规格：
50ug
目录号：E379-02A
产品描述:
CRISPR/Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。Cas9核酸酶是一种RNA引导的内切酶，能催化双链DNA的断裂,这种靶向核酸酶是高精度基因组编辑的有力工具。本制品在蛋白两端分别加了核定位信号（NLS），在C端加了EGFP序列。
Cas9蛋白与Crispr/Cas9系统的导向RNA（sgRNA）组成一个高度稳定的核糖核蛋白（RNP）复合物。当Cas9带有NLS表达序列时,Cas9-RNP复合体可以在进入细胞后立即定位到细胞核，无需体内转录或翻译。此外，与其他系统相比，Cas9-RNP复合物从细胞中迅速清除，最大限度地减少了脱靶效应。EGFP通过荧光激活细胞排序（FACS），使细胞群富集以进行所需的基因组编辑，显著降低了在基因组编辑应用中单细胞克隆和基因分型的人工和成本。
产品特点:
纯蛋白体系，避免CRISPR基因敲除时引入质粒或病毒干扰；蛋白带有EGFP标记，更易进行转染效率判断和细胞富集；可显著降低脱靶效应。
产品用途:
1. 基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲除；
2. 基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲入；
3. sgRNA剪切靶点DNA效率检测，降低体内筛选成本；
4. 体外剪切靶DNA的特异位点。
保存温度：
-20℃保存，或-80℃长期保存。
For research use only.
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文献和实验静脉注射，病毒注射总量为 1×10^11 vg/小鼠。Luc 的表达由 cTnT 启动子控制。（DOI: 10.1038/gt.2010.105） 图 4. 五种 AAV 血清型在小鼠体内的心脏基因递送效率比较。注射方式为左心室前壁注射，病毒注射总量为 5×10^10 vg/小鼠，体积为 10μL。Luc 的表达由 cTnT 启 动子控制。（DOI:10.1002/jgm.1576） 图 5. 五种 AAV 血清型以不同剂量注射至小鼠体内的心脏基因递送效率比较。注射方式为颈静脉注射。EGFP
157(6) (2014) 1262-1278. [5] K.H. Siu, W. Chen, Riboregulated toehold-gated gRNA for programmable CRISPR-Cas9 function, Nat Chem Biol 15(3) (2019) 217-220. [6] X.W. Wang, L.F. Hu, J. Hao, L.Q. Liao, Y.T. Chiu, M. Shi, Y. Wang, A microRNA-inducible
自然染色质免疫沉淀实验设计（Native Chromatin Immunoprecipitation (N-ChIP)）
(see below). 3.3. Preparation of samples: xul (total of 5ug) chromatin fraction (S1, S2 and P) yul dH2O (x+y = 25ul) 3ul 1% [w/v] SDS(final conc 0.1%) 2 ul gel loading buffer, containing bromophenol blue3.4. Stain the gel with 0.5ug/ml ethidium bromide after the run
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