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- 艾洛特
- ELT-100107
- 2026年04月27日
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货号：ELT-100107
规格：1×10^6 cells/T25培养瓶
价格： 请联系
细胞描述
人白血病T淋巴细胞，Jurkat细胞由Schneider建立，来源于一个14岁的男孩的外周血。该克隆Clone E6-1是 Jurkat-FHCRC细胞株的一个克隆（Jurkat的一个衍生株），同时也是CD3e敲除的单克隆细胞株。
细胞特性
1）来源：T淋巴细胞；急性T细胞白血病
2）形态：淋巴细胞样,悬浮生长
3）敲除位点：胞外区，Exon6
4）敲除方法：RNP电转
5）敲除验证：Sanger测序 pass，WB检测 pass
6） 含量：>1x106 细胞数
7） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
8) 用途：仅供科研使用。
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
推荐培养基及培养冻存：
1 培养条件：95% 空气 + 5% CO2 ，37℃，静态培养
2 培养体系：89% RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（青霉素-链霉素）
3 倍增时间：24h - 48h
4 传代比例：1:2 / 1:3
5冻存体系：50% RPMI-1640 + 40% FBS + 10% DMSO，液氮或-80℃
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文献和实验后在培养基中加入PHA-L和PMA可以激活Jurkat细胞中CMV启动子，而单PMA就足以激活KG1和K562(人骨髓瘤白细胞)中的CMV启动子。SV40启动子的表达在含有大T抗原(存在于COS-1和COS-7)时会提高，因为大T抗原可以刺激染色体外的合成。 06DNA量 高质量的DNA对于进行高效的转染至关重要。转染的质粒一定纯度好、浓度高、无内毒素。浓度不要低于0.35ug/ul。产物表达，48小时mRNA表达最高；72h蛋白表达最高。 07瞬时/稳定转染表达 稳定基因表达符合长期生产需求
2）。 图2 使用BLOCK-iT™ Complete Dicer RNAi Kit得到＞80％的靶定基因阻断 经Dicer酶切的，来源于β-半乳糖苷酶或者荧光素酶的dsRNA产生siRNA（d-siRNA）库，用来确定d-siRNA特异阻断基因活性的效果。GripTite™ 293 MSR 细胞共转染pcDNA™1.2/V5-GW/lacZ阳性对照质粒和pcDNA™5/FRT/luc，分别独自表达β-gal或者荧光素酶报告子，或者50ng luc 或者lacZ d-siRNA。对于每一种报告子
待检测基因-Luc/Rluc的重组质粒；2、细胞系选择: 根据实验需要选择细胞株，通常选择转染效率较高的293T细胞或原代细胞等；3、共转染: 将带有Luc/Rluc标记的报告基因和目的基因进行共转染，设置不同的检测时间点，一般为24h/48h；4、外界干预: 转染后，可进行物理/化学/病毒等的相应刺激；5、细胞处理: 采用进口/国产双荧光素酶检测试剂盒依照protocol操作；6、荧光检测: 使用GENios Pro 酶标仪或具有类似检测功能的设备进行荧光强度检测。三、荧光素酶报告基因的优点
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