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- 艾洛特
- ELT-100102
- 2026年01月03日
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- 文献和实验
- 技术资料
规格：1×10^6 cells/T25培养瓶
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细胞描述
人白血病T淋巴细胞，Jurkat细胞由Schneider建立，来源于一个14岁的男孩的外周血。该克隆Clone E6-1是 Jurkat-FHCRC细胞株的一个克隆（Jurkat的一个衍生株），同时也是CD3e敲除的单克隆细胞株。
细胞特性
1）来源：T淋巴细胞；急性T细胞白血病
2）形态：淋巴细胞样,悬浮生长
3）敲除位点：胞外区，Exon6
4）敲除方法：RNP电转
5）敲除验证：Sanger测序 pass，WB检测 pass
6） 含量：>1x106 细胞数
7） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
8) 用途：仅供科研使用。
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
推荐培养基及培养冻存：
1 培养条件：95% 空气 + 5% CO2 ，37℃，静态培养
2 培养体系：89% RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（青霉素-链霉素）
3 倍增时间：24h - 48h
4 传代比例：1:2 / 1:3
5冻存体系：50% RPMI-1640 + 40% FBS + 10% DMSO，液氮或-80℃
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文献和实验Jurkat细胞（人外周血白血病T细胞），是一种悬浮细胞。我的经验如下：1、培养液：RPMI1640，15％小牛血清，2％Na2CO3，1％HEPES，青霉素100IU／1ml，庆大霉素100IU／ml；2、培养条件：5％CO2，37度，30％湿度；3、细胞复苏：要快速将冻存管放入37度水中，不断轻轻摇晃，直到细胞完全溶解，加入10ml左右的培养液，800～1000rpm，10分钟离心，之后倒掉液体，加入新的培养基就可以进行培养了；4、细胞培养：起初进行传代时由于细胞刚刚复苏，长得比较
CRISPR-Cas9 全程实操教程：从 gRNA 设计到挑单克隆全程指导
冻存。10. 获得单克隆细胞株当肉眼可见类似于菌落的细胞团时，将其从大盘或 96 孔板消化下来转移至 12 或 24 孔板中继续扩大培养。注意不要污染到其它细胞团，不要选取过密的细胞团。11. 扩大培养，提取细胞全基因组 DNA 和细胞总蛋白12. 测序Guide 序列上游 100bp 左右和下游 200bp 左右为上下游设计一对引物，以全基因组为模板，以上述引物进行 PCR。PCR 产物送测序，或将产物用 T7E1 进行酶切消化检测突变。13. Western与阴性对照相比，靶基因应完全敲除
示例： Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h，FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后，流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞，Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况，检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法： 1） 选中所有颗粒，将FSC
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