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规格:1×10^6 cells/T25培养瓶
价格: 请联系
细胞描述
人白血病T淋巴细胞,Jurkat细胞由Schneider建立,来源于一个14岁的男孩的外周血。该克隆Clone E6-1是 Jurkat-FHCRC细胞株的一个克隆(Jurkat的一个衍生株),同时也是CD3e敲除的单克隆细胞株。
细胞特性
1)来源:T淋巴细胞;急性T细胞白血病
2)形态:淋巴细胞样,悬浮生长
3)敲除位点:胞外区,Exon6
4)敲除方法:RNP电转
5)敲除验证:Sanger测序 pass,WB检测 pass
6) 含量:>1x106 细胞数
7) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
8) 用途:仅供科研使用。
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
推荐培养基及培养冻存:
1 培养条件:95% 空气 + 5% CO2 ,37℃,静态培养
2 培养体系:89% RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(青霉素-链霉素)
3 倍增时间:24h - 48h
4 传代比例:1:2 / 1:3
5冻存体系:50% RPMI-1640 + 40% FBS + 10% DMSO,液氮或-80℃
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文献和实验两只小密封 不好意思,刚开始新的研究方向,涉及到要用基因敲除小鼠模型。有若干不懂的名词求助: 除题目上的问题外,还有类似Egr2 f/f CD4 -/- (右上角的f和-分别代表什么意思呀?有时候还是+/-)。不知道我得问题大家看懂了没有。。。。。实在是汗。在线等答案。谢谢啦!! laddcat123 Egr2 f/f CD4 -/-: f代表是条件性沉默,利用Cre蛋白可以使其沉默
Jurkat细胞(人外周血白血病T细胞),是一种悬浮细胞。我的经验如下:1、培养液:RPMI1640,15%小牛血清,2%Na2CO3,1%HEPES,青霉素100IU/1ml,庆大霉素100IU/ml;2、培养条件:5%CO2,37度,30%湿度;3、细胞复苏:要快速将冻存管放入37度水中,不断轻轻摇晃,直到细胞完全溶解,加入10ml左右的培养液,800~1000rpm,10分钟离心,之后倒掉液体,加入新的培养基就可以进行培养了;4、细胞培养:起初进行传代时由于细胞刚刚复苏,长得比较
CRISPR-Cas9 全程实操教程:从 gRNA 设计到挑单克隆全程指导
冻存。10. 获得单克隆细胞株当肉眼可见类似于菌落的细胞团时,将其从大盘或 96 孔板消化下来转移至 12 或 24 孔板中继续扩大培养。注意不要污染到其它细胞团,不要选取过密的细胞团。11. 扩大培养,提取细胞全基因组 DNA 和细胞总蛋白12. 测序Guide 序列上游 100bp 左右和下游 200bp 左右为上下游设计一对引物,以全基因组为模板,以上述引物进行 PCR。PCR 产物送测序,或将产物用 T7E1 进行酶切消化检测突变。13. Western与阴性对照相比,靶基因应完全敲除
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