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- YLKBIO
- YLK-XB1795
- 上海
- 2025年12月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
/
- 细胞类型：
细胞系
- 肿瘤类型：
/
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 库存：
100
- 英文名：
RKO-AS-45-1; RKO-AS45-1; RKO_AS45
- 生长状态：
贴壁生长
- 年限：
永久
- 运输方式：
快递形式
- 器官来源：
/
- 是否是肿瘤细胞：
/
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 免疫类型：
/
- 物种来源：
人
- 相关疾病：
/
- 组织来源：
/
- 规格：
1×10⁶cells/T25培养瓶
细胞英文名称：RKO-AS-45-1; RKO-AS45-1; RKO_AS45
细胞中文名称：RKOAS451人结肠癌转基因细胞(带STR鉴定)
| 名称 | RKO-AS45-1 (人结肠癌转基因细胞) (STR鉴定正确) |
| 别称 | RKO-AS-45-1; RKOAS451; RKO_AS45 |
| 种属 | 人 |
| 组织来源 | 结肠癌，整合起动GADD45a表达载体的CMV启动子 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 背景描述 | 人的cDNA中编码GADD45的开放阅读框克隆到表达载体pCMV.3中，转染结肠癌细胞RKO，建立了RKO-AS45-1细胞株。RKO-AS45-1细胞含有稳定整合巨细胞病毒(CMV)启动子的表达载体，RKO-AS45-1细胞系和它的母系RKO一起可用于GADD45对DNA修复、凋亡和药物敏感性研究。 |
| 生长培养基 | MEM＋10% FBS＋1% P/S |
| 推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
| 推荐换液频率 | 2~3次/周 |
| 冻存条件 | 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度：液氮 |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃ |
| 基因表达情况 | p53+ (underexpressed) |
| 保藏机构 | ATCC; CRL-2579 |
STR位点信息
| Amelogenin | X | D21S11 | 28,30 |
| CSF1PO | 8,11 | FGA | 20,22 |
| D2S1338 | 16 | PentaD | 10,11.1 |
| D3S1358 | 15,16,18 | PentaE | 11,13 |
| D5S818 | 11,13 | TH01 | 6,10 |
| D7S820 | 8,10 | TPOX | 10,11 |
| D8S1179 | 9,14 | vWA | 16,24 |
| D13S317 | 8,11 | D1S1656 | 14,15.3 |
| D16S539 | 12,13 | D6S1043 | 14.1,20 |
| D18S51 | 11,12 | D12S391 | 15,20 |
| D19S433 | 14 |
1、 细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃， 5%CO2 细胞
培养箱中培养；
2、 细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）用适量的冻存液（FBS： DMSO=9 ： 1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜， 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结
晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀用 6ml 完全培养基重悬，接种 25cm2 培养瓶，于 37℃， 5%CO2 细胞培养箱中培养
RKOAS451人结肠癌转基因细胞(带STR鉴定)收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液移入废液缸中，悬浮细胞需离心处理，加入6ml新鲜完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤说明书。
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识，因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……，这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁，要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
IJMS:利用转基因水稻种子表达功能性重组人碱性成纤维细胞生长因子
由武汉大学生命科学院教授、武汉禾元生物科技有限公司董事长杨代常领衔的研发团队历经3年的研究与开发，利用水稻种子表达出多功效的重组人碱性成纤维细胞生长因子。相关论文 “Expression of a Functional Recombinant Human Basic Fibroblast Growth Factor from Transgenic Rice Seeds”(利用转基因水稻种子表达功能性重组人碱性成纤维细胞生长因子)于2013年2月7日在线发表于 《International
胚胎干细胞的囊胚注射法构建 Cre 转基因动物 先将Cre时空特异表达载体 线性化，之后用电穿孔等方法将其导人胚胎干细胞中，并以同源重组的方式整合进胚胎干细胞的基因组。这种经过遗传改造的胚胎干细胞再被注入囊胚，最后将胚胎植入假孕母鼠的子宫，使其发育成为一个个体。囊胚注射法的具体步骤如下。 (1)选择合适的载体，将Cre重组酶的编码基因与其重组，构建重组质粒。 (2)重组质粒线性化后，用电穿孔、脂质体等方法将其转人体外培养的小鼠胚胎干细胞中。
