IDT Alt-R CRISPR-Cas9 Control

IDT Alt-R™ CRISPR-Cas9、CRISPR-Cas12a(Cpf1)基因编辑系统工具
——crRNA、sgRNA合成，重组Cas9核酸酶、Cas12a(Cpf1)核酸酶

 
北京泽平代理的进口IDT（Integrated DNA Technologies）Alt-R™ CRISPR-Cas9、CRISPR-Cas12a(Cpf1)基因编辑系统，提供免费序列设计工具，提供化学合成crRNA、sgRNA的定制合成服务，并生产商品化通用型tracrRNA、高保真或荧光修饰的重组Cas9核酸酶、重组Cas12a(Cpf1)核酸酶、重组Cas9切口酶（缺口酶）、重组dCas9蛋白（占位蛋白）、以及增强RNP电转染效率的电穿孔增强剂、增强HDR（同源重组修复）概率的HDR增强剂、HDR供体DNA的化学合成服务，提供从设计到多重基因组编辑、CRISPR干扰等试剂的工具平台。





北京泽平作为丹纳赫集团（Danaher）旗下IDT（Intergated DNA Technologies）中国一级代理商，提供IDT CRISPR/Cas9基因编辑试剂、oligo寡合苷酸合成服务（PCR引物合成、200bp长链DNA合成）、qPCR双淬灭探针合成服务等。自2020年IDT中国公司正式成立以来，北京泽平作为丹纳赫集团战略合作伙伴，一直致力于为中国生命科学研究者带来更优质的服务体验。

①IDT官方授权，完整进口手续，正品保证
②专业技术支持团队，中文咨询服务，解决实验问题
③完善销售流程，售前、售后服务
④中国一级代理商，优势价格，核酸酶现货销售

tips：Ctrl+F，可在浏览器中快速搜索货号、产品关键词，如未能找到产品，请来电咨询17812778052


 


IDT Alt-R™ CRISPR-Cas9产品


1、Cas9核酸酶

Alt-R™ Cas9核酸酶，S. pyogene来源Cas9，大肠杆菌表达纯化，添加NLS（Nuclear localization sequence，NLS）和C端6-His标签。以10μg/μL的溶液提供。100μg Cas9核酸酶=610pmol。

货号	产品名称	规格	备注
1081058	Alt-R™ S.p. Cas9 Nuclease V3, 100 µg	100 µg	野生型，10 µg/µL，100 µg = 610 pmol.
1081059	Alt-R™ S.p. Cas9 Nuclease V3, 500 µg	500 µg
10000735	Alt-R™ S.p. Cas9 Nuclease V3, 5 mg	5 mg

 
Alt-R™ HiFi Cas9高保真核酸酶，经序列优化，显著提高中靶率，是常规实验的更佳选择，非常适合棘手的基因组编辑应用。

货号	产品名称	规格	备注
1081060	Alt-R™ S.p. HiFi Cas9 Nuclease V3, 100 µg	100 µg	100 µg = 610 pmol
1081061	Alt-R™ S.p. HiFi Cas9 Nuclease V3, 500 µg	500 µg
10007803	Alt-R™ S.p. HiFi Cas9 Nuclease V3, 5 mg	5 mg

 

Alt-R™ Cas9-GFP核酸酶、Alt-R™ Cas9-RFP核酸酶，具有NLS和C端6-His标签。添加GFP绿色荧光、或RFP红色荧光修饰，专为需要蛋白质转染后可视化、或使用荧光激活细胞分选 (FACS) 富集编辑细胞的应用设计。

货号	产品名称	规格	备注
10008100	Alt-R™ S.p.Cas9-GFP V3, 100 µg	100 µg	GFP标签，10 µg/µL，100 µg = 530 pmol.
10008161	Alt-R™ S.p.Cas9-GFP V3, 500 µg	500 µg
10008162	Alt-R™ S.p.Cas9-RFP V3, 100 µg	100 µg	RFP标签，10 µg/µL，100 µg = 530 pmol.
10008163	Alt-R™ S.p.Cas9-RFP V3, 500 µg	500 µg

 
Alt-R™ Cas9核酸酶（不含甘油），具有NLS和C端6-His标签。以10µg/µL的无甘油溶液形式提供。

货号	产品名称	规格	备注
10007806	Alt-R™ S.p.Cas9 V3, glycerol-free, 100µg	100 µg	无甘油，10 µg/µL，100 µg = 610 pmol
<10007807	Alt-R™ S.p.Cas9 V3, glycerol-free, 500µg	500 µg
10007808	Alt-R™ S.p.Cas9 V3, glycerol-free, 5mg	5 mg

 
2、Cas9切口酶

Alt-R™ Cas9切口酶/缺口酶，S. pyogene来源Cas9，大肠杆菌表达纯化，添加NLS和C端6-His标签。其中Alt-R™ Cas9 D10A切口酶中RuvC-like内切酶结构域功能失活，对DNA靶向链进行单链切割。Alt-R™ Cas9 H840A切口酶，HNH结构域失活，对非靶向链单链切割。以10μg/μL的溶液提供。100μg Cas9切口酶=610pmol。

货号	产品名称	规格	备注
1081062	Alt-R™ S.p. Cas9 D10A Nickase V3, 100 µg	100 µg	缺口酶，切割靶向链（不包含PAM的链）
1081063	Alt-R™ S.p. Cas9 D10A Nickase V3, 500 µg	500 µg
1081064	Alt-R™ S.p. Cas9 H840A Nickase V3, 100 µg	100 µg	缺口酶，切割非靶向链（包含PAM的链）
1081065	Alt-R™ S.p. Cas9 H840A Nickase V3, 500 µg	500 µg

 

3、dCas9蛋白

Alt-R™ dCas9占位蛋白，S. pyogene来源Cas9，大肠杆菌表达纯化，丧失内切酶功能，添加NLS和C端6-His标签。dCas9蛋白可用于CRISPRi，进行基因下调（knockdown）等，相比RNAi，由于CRISPRi需要在转录起始位点附近才能发挥功能，其脱靶率远低于RNAi。Alt-R™ dCas9蛋白，以10μg/μL的溶液提供。100μg dCas9蛋白=610pmol。

货号	产品名称	规格	备注
1081066	Alt-R™ S.p. dCas9 Protein V3, 100 µg	100 µg	无切割活性
1081067	Alt-R™ S.p. dCas9 Protein V3,500 µg	500 µg

 

4、crRNA（定制）

Alt-R™ crRNA，由19-20nt特异性序列（定制）和16nt通用序列融合形成，相比野生型，序列更短，中靶率更高。经化学修饰防止被细胞核糖核酸酶降解，必须与tracrRNA一起使用以形成gRNA。

Alt-R™ crRNA XT，相比Alt-R™ crRNA，经其他化学修饰，用于高核酸酶条件或带有Cas9 mRNA的实验，可提高基因编辑的稳定性。必须与tracrRNA一起使用。

货号	产品名称	规格	备注
定制	Alt-R™ CRISPR-Cas9 crRNA, 2 nmol	2 nmol	36nt，带Alt-R修饰，与tracrRNA结合使用
定制	Alt-R™ CRISPR-Cas9 crRNA, 10 nmol	10 nmol
定制	Alt-R™ CRISPR-Cas9 crRNA, 50 nmol	50 nmol
定制	Alt-R™ CRISPR-Cas9 crRNA, 100 nmol	100 nmol
定制	Alt-R™ CRISPR-Cas9 crRNA XT, 2 nmol	2 nmol	36nt，比crRNA多了额外化学修饰，更稳定
定制	Alt-R™ CRISPR-Cas9 crRNA XT, 10 nmol	10 nmol

 

5、sgRNA（定制）

Alt-R™ sgRNA，由crRNA和tracrRNA序列融合组成的单个RNA，含有19-20nt的特异性序列（定制）和80nt通用序列，经化学修饰，稳定性更高，用于高核酸酶条件或带有Cas9 mRNA的实验。相比体外转录的sgRNA，减少细胞免疫反应，更小细胞毒性。

货号	产品名称	规格	备注
定制	Alt-R™ CRISPR-Cas9 sgRNA, 2 nmol	2 nmol	100nt，两端有2’OMe 碱基和硫代磷酸酯PS修饰
定制	Alt-R™ CRISPR-Cas9 sgRNA, 10 nmol	10 nmol
定制	Alt-R™ CRISPR-Cas9 sgRNA, 50 nmol	50 nmol
定制	Alt-R™ CRISPR-Cas9 sgRNA, 100 nmol	100nmol

 

6、tracrRNA

Alt-R™ tracrRNA，通用67nt序列，远远短于野生型的89nt，缩短后性能提高，经化学修饰，具有核酸酶抗性。可提供荧光标记，测定转染效率。必须与crRNA一起使用以形成gRNA。

货号	产品名称	规格	备注
1072532	Alt-R™ CRISPR-Cas9 tracrRNA, 5 nmol	5 nmol	67nt，与crRNA结合使用
1072533	Alt-R™ CRISPR-Cas9 tracrRNA, 20 nmol	20 nmol
1072534	Alt-R™ CRISPR-Cas9 tracrRNA, 100 nmol	100 nmol
1075927	Alt-R™ CRISPR-Cas9 tracrRNA, ATTO™ 550, 5 nmol	5 nmol	67nt，带ATTO荧光
1075928	Alt-R™ CRISPR-Cas9 tracrRNA, ATTO™ 550, 20 nmol	20 nmol

图.稳定表达Cas9蛋白的HEK-293细胞，转染Alt-R™ crRNA(未标记):tracrRNA(标记)，转染后48小时，荧光显微镜下10倍放大。 

 

7、电穿孔增强剂

Alt-R™ Cas9电穿孔Enhancer，是Cas9特异性的载体DNA，当使用原代细胞或难转染细胞时，可提高Lonza(原Amaxa）Nucleofector核转染系统等电穿孔设备对RNP的转染效率，进而提高基因编辑效率。

货号	产品名称	规格	备注
1075915	Alt-R™ Cas9 Electroporation Enhancer, 2 nmol	2 nmol	电穿孔增强剂，增强转染效率
1075916	Alt-R™ Cas9 Electroporation Enhancer, 10 nmol	10 nmol
10007805	Alt-R™ Cas9 Elec Enhancer, 100 nmol	100 nmol

 

8、HDR增强剂

Alt-R™ HDR Enhancer，小分子化合物，可提高同源重组修复概率。在包括贴壁、悬浮的大量细胞系中均有活性，可用于Cas9核酸酶、Cas12a（Cpf1）核酸酶。

货号	产品名称	规格	备注
10007910	Alt-R™ HDR Enhancer V2, 30 µL	30 µL	HDR增强剂，增加同源重组修复倾向性
10007921	Alt-R™ HDR Enhancer V2, 150 µL	150 µL
1081072	Alt-R™ HDR Enhancer, 100 µL	100 µL
1081073	Alt-R™ HDR Enhancer, 500 µL	500 µL

 

9、供体DNA（定制）

Alt-R™ HDR供体寡核苷酸，专门为同源重组修复基因敲入开发，具有比标准寡核苷酸更高的稳定性和更高的掺入率，可同时用于Cas9核酸酶和Cas9切口酶。

货号	产品名称	规格	备注
定制	Alt-R HDR Donor Oligo, 2 nmol	2 nmol	45-200nt，Alt-R修饰和硫代磷酸酯PS修饰
定制	Alt-R HDR Donor Oligo, 10 nmol	10 nmol
定制	Alt-R™ HDR Donor Block, 201-500 bp, 3 µg	3 µg	非常适合进行段基因组的修改和插入；带修饰双链DNA
定制	Alt-R™ HDR Donor Block, 201-500 bp, 10 µg	10 µg
定制	Alt-R™ HDR Donor Block, 501-2000 bp, 3 µg	3 µg
定制	Alt-R™ HDR Donor Block, 501-2000 bp, 10 µg	10 µg
定制	Alt-R™ HDR Donor Block, 2001-3000 bp, 3 µg	3 µg
定制	Alt-R™ HDR Donor Block, 2001-3000 bp, 10 µg	10 µg

 

IDT Alt-R™ CRISPR-Cas12a（Cpf1）产品

 
1、Cas12a（Cpf1）核酸酶

Alt-R™ Cas12a（Cpf1）核酸酶，添加核定位序列（Nuclear localization sequence，NLS），经序列优化，提高中靶率，降低脱靶率。V3酶和Ultra酶均可识别TTTV，而Ultra核酸酶增加了对TTTT的PAM（前间区序列邻近基序，protospacer adjacent motif）识别。注：V=A、C、G

货号	产品名称	规格	备注
1081068	Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) V3, 100 µg	100 µg	识别TTTV位点，10 µg/µL，100 µg = 633 pmol
1081069	Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) V3, 500 µg	500 µg
10001272	Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) Ultra, 100 µg	100 µg	识别TTTN位点，N表示A、T、C、G碱基
10001273	Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) Ultra, 500 µg	500 µg
10007804	Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) Ultra, 5 mg	5 mg
10007922	Alt-R™ L.b. Cas12a (Cpf1) Ultra, 100 µg	100 µg	识别TTTN位点，10 µg/µL，100 µg = 670 pmol
10007923	Alt-R™ L.b. Cas12a (Cpf1) Ultra, 500 µg	500 µg
10007924	Alt-R™ L.b. Cas12a (Cpf1) Ultra, 5 mg	5 mg

 

2、crRNA（定制）

Alt-R™ Cas12a crRNA，定制合成的crRNA，包含20-24nt的特异性序列（定制）和20nt的通用序列，相比野生型，序列更短，中靶率更高。经化学修饰防止被细胞核糖核酸酶降解。需要与Cas12a（Cpf1）核酸酶结合形成RNP复合体。

货号	产品名称	规格	备注
定制	Alt-R™As Cas12a crRNA，2 nmol	2 nmol	40-45bp，与As.cas12a酶结合使用
定制	Alt-R™As Cas12a crRNA，10 nmol	10 nmol
定制	Alt-R™ L.b. Cas12a crRNA, 2 nmol	2 nmol	40-45bp，与L.b.cas12a酶结合使用
定制	Alt-R™ L.b. Cas12a crRNA, 10 nmol	10 nmol

 

3、电穿孔增强剂

Alt-R™ Cas12a电穿孔Enhancer，是Cas12a特异性的载体DNA，当使用原代细胞或难转染细胞系时，可提高Lonza(原Amaxa）Nucleofector核转染系统等电穿孔设备的对RNP的转染效率，进而提高实验效率。

货号	产品名称	规格	备注
1076300	Alt-R™ Cpf1 Electroporation Enhancer, 2 nmol	2 nmol	电穿孔增强剂，增强转染效率
1076301	Alt-R™ Cpf1 Electroporation Enhancer, 10 nmol	10 nmol

 

4、HDR增强剂

Alt-R™ HDR Enhancer，小分子化合物，可提高同源重组修复概率。在包括贴壁、悬浮的大量细胞系中均有活性，可用于Cas12a（Cpf1）核酸酶、Cas9核酸酶。

货号	产品名称	规格	备注
10007910	Alt-R™ HDR Enhancer V2, 30 µL	30 µL	HDR增强剂，增加同源重组修复倾向性
10007921	Alt-R™ HDR Enhancer V2, 150 µL	150 µL
1081072	Alt-R™ HDR Enhancer, 100 µL	100 µL
1081073	Alt-R™ HDR Enhancer, 500 µL	500 µL

 

 

5、供体DNA（定制）

Alt-R™ HDR供体寡核苷酸：专门为同源重组修复基因敲入开发，具有比标准寡核苷酸更高的稳定性和更高的掺入率。

货号	产品名称	规格	备注
定制	Alt-R HDR Donor Oligo, 2 nmol	2 nmol	45-200nt，Alt-R修饰和硫代磷酸酯PS修饰
定制	Alt-R HDR Donor Oligo, 10 nmol	10 nmol
定制	Alt-R™ HDR Donor Block, 201-500 bp, 3 µg	3 µg	非常适合进行段基因组的修改和插入；带修饰双链DNA
定制	Alt-R™ HDR Donor Block, 201-500 bp, 10 µg	10 µg
定制	Alt-R™ HDR Donor Block, 501-2000 bp, 3 µg	3 µg
定制	Alt-R™ HDR Donor Block, 501-2000 bp, 10 µg	10 µg
定制	Alt-R™ HDR Donor Block, 2001-3000 bp, 3 µg	3 µg
定制	Alt-R™ HDR Donor Block, 2001-3000 bp, 10 µg	10 µg

 

 

其他CRISPR-Cas基因编辑产品
 

货号	产品名称	规格
1072554	Alt-R™ CRISPR-Cas9 Control Kit, Human, 2 nmol	2nmol
1072555	Alt-R™ CRISPR-Cas9 Control Kit, Mouse, 2 nmol	2nmol
1072541	Alt-R™ CRISPR-Cas9 Positive Control crRNA, Human HPRT, 2 nmol	2nmol
1072542	Alt-R™ CRISPR-Cas9 Positive Control crRNA, Mouse HPRT, 2 nmol	2nmol
1072544	Alt-R™ CRISPR-Cas9 Negative Control crRNA #1, 2 nmol	2nmol
1072545	Alt-R™ CRISPR-Cas9 Negative Control crRNA #2, 2 nmol	2nmol
1072546	Alt-R™ CRISPR-Cas9 Negative Control crRNA #3, 2 nmol	2nmol
1072551	Alt-R™ HPRT PCR Primer Mix, Human, 2 nmol	2nmol
1072552	Alt-R™ HPRT PCR Primer Mix, Mouse, 2 nmol	2nmol
1075931	Alt-R™ Genome Editing Detection Kit, 25 rxn	25rxn
1075932	Alt-R™ Genome Editing Detection Kit, 100 rxn	100rxn

 

Cas9和Cas12a系统区别和应用

 

IDT Alt-R™ CRISPR		Alt-R™ CRISPR-Cas9系统					Alt-R™ CRISPR-Cas12a（Cpf1）系统
		Alt-R™ Cas9核酸酶	Alt-R™ HiFi Cas9高保真核酸酶	Alt-R™ Cas9 D10A切口酶	Alt-R™ Cas9 H840A切口酶	Alt-R™ dCas9蛋白	Alt-R™ Cas12a核酸酶
特点		通用Cas9酶，易于使用且经济实惠	经序列优化的Cas9酶，提高中靶率，降低脱靶率，高性价比	突变的Cas9酶，在RuvC-like结构域中发生突变，使其缺失在非靶向链的切割能力	突变的Cas9酶，在HNH结构域中发生突变，使其缺失在靶向链的切割能力	突变的Cas9酶，仅结合靶向DNA，缺失核酸酶切割能力	通用Cas12a酶，富含AT的物种，或使用CRISPR-Cas9有限制
PAM识别		NGG					TTTV或TTTN
DNA切割		双链	双链	靶向链	非靶向链	\	双链
末端		平末端		5’突出	3’突出	\	5’突出
建议用途		一般基因编辑实验	满足大多数CRISPR基因编辑需求，兼顾效率和成本	适用于同时使用2种crRNA，各自识别并切割2条链中一条，通过将spacer由20nt提高到40nt，实现更高特异性		基因沉默，CRISPR干扰CRISPRi	无法使用Cas9的基因编辑实验
规格		100 μg或500 μg
Cas9+gRNA	crRNA	19-20nt特异性序列（推荐使用20nt），16nt通用序列					\
	tracrRNA	67nt通用序列					\
Cas9+sgRNA	sgRNA	19-20nt特异性序列（推荐使用20nt），80nt通用序列，经过序列修饰，不会引起细胞免疫反应，不会激活无关的基因					\
Cas12a+crRNA	crRNA	\					20-24nt特异性序列（推荐使用21nt），20nt通用序列

注：
N=任意碱基
V=A、C、G


 

 

参考文献
 
1. Large-scale GMP-compliant CRISPR-Cas9–mediated deletion of the glucocorticoid receptor in multivirus-specific T cells. Rafet Basar,et al.，Blood Advances (2020) 4 (14): 3357–3367
2. Partner independent fusion gene detection by multiplexed CRISPR-Cas9 enrichment and long read nanopore sequencing.Christina Stangl,et al.,Nature Communications volume 11, Article number: 2861 (2020)
3. sgRNA Sequence Motifs Blocking Efficient CRISPR/Cas9-Mediated Gene Editing. Robin Graf,et al.,Cell Reports,Volume 26, Issue 5, 29 January 2019, Pages 1098-1103.e3
4. Rapid in vitro production of single-stranded DNA. Dionis Minev,et al.，Nucleic Acids Research, Volume 47, Issue 22, 16 December 2019, Pages 11956–11962
5. Neuron-Specific Genome Modification in the Adult Rat Brain Using CRISPR-Cas9 Transgenic Rats.Susanne Bäck,et al.,Neuron,Volume 102, Issue 1, 3 April 2019, Pages 105-119.e8
6. Highly Efficient Transgenesis in Ferrets Using CRISPR/Cas9-Mediated Homology-Independent Insertion at the ROSA26 Locus.Miao Yu,et al.,Scientific Reports volume 9, Article number: 1971 (2019) 
7. RNA‐guided endonuclease – in situ labelling (RGEN‐ISL): a fast CRISPR/Cas9‐based method to label genomic sequences in various species.Takayoshi Ishii,et al., New Phytol. 2019 May; 222(3): 1652–1661.
8. A high-fidelity Cas9 mutant delivered as a ribonucleoprotein complex enables efficient gene editing in human hematopoietic stem and progenitor cells. Christopher A. Vakulskas,et al.,Naturemedicine,Published: 06 August 2018
9. Increasing Cas9-mediated homology-directed repair efficiency through covalent tethering of DNA repair template. Eric J. Aird,et al.,Communications biology, Published: 31 May 2018

 


 
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