- ￥3870
- 近岸蛋白(Novoprotein)
- E198-01B
- 中国
- 2026年03月24日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
RNA-direct qPCR Master Mix
- 规格：
500次（20μl体系）
目录号：E198-01B
产品描述:
本制品是采用探针法进行一步法qRT-PCR的定性、定量反应专用试剂。在同一体系中，完成从反转录到qPCR的全部反应。本制品采用配体修饰的Tth酶，通过高温反转录过程，有效消除了RNA高级结构和低温条件下引物非特异性退火对cDNA合成的不利影响，从而增加了反转录的特异性，提高了扩增的效率和产量。并结合特别配方的反应缓冲液，可以在较宽的定量区域内得到良好的标准曲线，准确定量。
产品特点:
同时具有反转录酶活性与聚合酶活性，能够用于一步法检测。
具有更高的反转录温度60℃~70℃，反转录的特异性高。
对PCR抑制物具有更高的耐受性。
使用建议：
使用时请上下颠倒轻轻混合，避免起泡，并经轻微离心后使用。反应液的配制、分装请使用新的（无污染的）枪头、Microtube等，尽量避免污染。
保存温度：
-20℃储存。
保存温度：
The role of miR-92 in regulating early development and metamorphosis of Japanese flounder Paralichthys olivaceus[J]. Xuemei Li. et al. Genes & Genetic Systems. 2019.
For research use only.
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文献和实验几个复孔，选择重复性好的 CT 值参与计算。 （2）CT＜30，重复性较差。这种情况一般同操作有关。 解决办法：从以下几个方面进行问题的排查：①加样准确度；②移液器吸取液体的准确度；③定期校准 qPCR 仪。 ①加样准确度 避免小体积加样，减少加样误差。可以将引物、SYBR Green Mix、ddH2O 配置成混合体系，并且增加模板的稀释梯度，大体积加样。如：原液 cDNA 添加 1μl，可以更改为原液 cDNA 稀释 5 倍，添加 5μl，使用 ddH2O 补齐体系至 20μl 即可
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为100-400mM；模板如果是总RNA一般是10ng-500，如果cDNA，通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液，要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值，在操作过程中，还需要根据所用
成功做完了逆转录，这时候可能有些疲累了。筛引物、做定量的时候要加样的孔也较多，即使使用了 qPCR 预混液，也有加错样的可能发生。诺唯赞的 ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix 系列（Q411 /Q421 /Q431 /Q441）提供不同颜色的试剂，利用移液过程中的变色效应，追踪移液过程，可以极大的减少移液错误。 引物设计有原则 在使用 SYBR 染料法时，引物设计需遵循以下原则：引物长度 18～25bp，产物长度 80～300bp，GC 含量 40～60
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