PCR低温指示冰盒，PP材质，带透明盖

目的基因片段的PCR扩增与克隆

1.PCR技术PolymeraseChainReaction聚合酶链反应它是一种模拟天然DNA复制过程，在有DNA模板、DNA聚合酶（Taq酶）、RNA引物和四种dNTP的情况下，通过高温变性（90℃－95℃，1－2min）,低温退火（25℃－37℃，1－2min）,中温延伸（60℃－75℃，90sec-5min）,这样反复循环的过程中，在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学技术。1）、PCR反应成分： TaqDNA聚合酶引物浓度：一般0.1-0.5μmol/LdNTP:一般为50－200μ

电泳技术

，待脱凝固后，取出梳子，加入适量电极缓冲液使板胶浸没在缓冲液下1mm处。 ⑶样品制备与加样：溶解于TBE或THE内的样品应含指示染料（0.025%溴酚蓝或桔黄橙）、蔗糖（10%～15%）或甘油（5%～10%），也可使用2.5%Fico Ⅱ增加比重，使样品集中，每齿孔可加样5～10μg。 ⑷电泳：一般电压为5～15V/cm。对大分子的分离可用电压5V/cm。电泳过程最好在低温条件下进行。 ⑸样品回收：电泳结束后在紫外灯下观察样品的分离情况，对需要的DNA分子或特殊片段可从电泳后的凝胶中以不同

检测鼠肝肌动蛋白(p―acdn)基因

μl，用TE缓冲液稀释至3ml(1:30稀释)，(若DNA原液太浓，取原液50μl，太稀则取原液200u1)。在紫外分光光度计中测定O.D260nm及O.D280nm的读数。计算：O.D260nm/O.D280nm比值，DNA浓度及DNA总量。剩余原液写上标记，留作做PCR实验， 注意事项： 1.为尽可能避免DNA大分子的断裂，在实验过程中必须 (1)匀浆时应保持低温，匀浆时间应短，勿用玻璃匀浆器。 (2)实验中使用的吸取DNA水溶液的滴管管口需粗而短，并烧成钝口。 (3)酚抽提时勿