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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT
- 库存:
100
- CAS号:
1806-34-4
- 规格:
1g
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文献和实验一、原理淋巴细胞在有丝分裂原PHA、ConA 等的刺激下,产生增殖反应,DNA和RNA合成明显增加,如在培养液中加入3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR),则可被转化中的细胞摄入。测定标记淋巴细胞的放射强度可反映淋巴细胞增殖的程度。二、仪器和材料RPMI-1640 细胞培养液、小牛血清、2-巯基乙醇(2-ME)、青霉素、链霉素、刀豆蛋白A(ConA)、Hank's液、PBS缓冲液(pH7.2-7.4)、3H-TdR、闪烁液[2,5-二苯基恶唑(PPO)0.5g、1,4-双-(5-苯基恶唑基)-苯
噁唑) 5.00g POPOP[1,4-双(5-苯基噁唑基-2苯)] 0.30g 无水乙醇 200.00ml 甲苯 800.00ml 混合即可 (二)操作方法 1.培养液中按1%的体积加双抗(含青霉素1万U/ml,链霉素0.01g/ml)及肝素液(含肝素100U/ml)。用3.5%NaHCO 3 液调pH值为7.2~7.4,然后加灭活的小牛血清,使浓度为20%。再加PHA(50U~75U/ml),无菌分装于培养瓶内,每瓶1ml。
一、材料及试剂1、培养基:RPMI-1640或TC199培养液2、PHA;同形态学方法3、小牛血清4、3H-TdR;选用比活性为2Mci~10Mci/mg分子的制品,将1Mci/ml溶液以生理盐水稀释成100uci/ml,于4℃保存备用。临用时再用培养液稀释成10uci/ml溶液。5、3%冰醋酸6、浓甲醛7、30%H2O2液8、闪烁液PPO(2,5二苯基噁唑);5.00gPOPOP[1,4-双(5-苯基噁唑基-2苯;0.30g无水乙醇;200.00ml甲苯;800.00ml混合即可二、操作
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