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    首页 / 试剂 /  / 聚合酶 / PCR Master Mix 高保真酶预混液(含染料)

    PCR Master Mix

    高保真酶预混液(含染料)
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    PCR Master Mix  高保真酶预混液(含染料)
    价格: ¥105
    品牌: Yeasen翌圣
    试用品规格: 100 μL
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    试用份额:
    5

    试用倒计时:
    xx xx xx xx秒后结束
    试用说明:
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      • 数量: 大量
      • 英文名: 2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye)
      • CAS号: 点击查看
      • 保质期: 有效期1年
      • 供应商: 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
      • 保存条件: -20℃保存
      • 规格: 100 μL

      产品信息

       

      产品名称

      产品编号

      规格

      价格(元)

      2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye) 高保真酶预混液

      10154ES01

      100 μL

      105.00

      10154ES03

      1 mL

      585.00

      10154ES08

      5×1 mL

      1,655.00

       

      产品描述
       

      2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye)是即用型2×预混合溶液,包含Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA PolymerasedNTPs以及优化的缓冲体系。预混液中添加了常温可抑制聚合酶活性和3→5核酸外切酶活性的两种单克隆抗体,可简便地进行高特异性的Hot Start PCR。预混液中添加了延伸因子使得该酶具有长片段扩增能力,扩增目的片段的长度可长达13 kb,该酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性,其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍,是普通Pfu DNA聚合酶的9倍。适用于复杂模板的扩增,扩增产物为平末端。
      2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye)具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,反应体系只需加入引物和模板即可,并可以通过两步法的程序进行扩增,简化了实验步骤,节省了时间。本产品中含有电泳指示染料,PCR产物可直接进行电泳。另外,该产品还含有特异保护剂,使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。

       

      产品应用

       

      基因克隆;复杂DNA模板扩增;高通量建库。

       

      运输与保存方法

       

      冰袋运输。-20°C保存。有效期1年。

       

      注意事项

       

      1为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

      2本产品仅作科研用途

       

      推荐PCR反应体系
       

      组分

      体积

      终浓度

      ddH2O

      to 50 μL

      -

      DNA模板

      适量

      -

      Primer正向 (10 μM)

      2 μL

      0.4 μM

      Primer反向 (10 μM)

      2 μL

      0.4 μM

      2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye)

      25 μL

            【注】:1)聚合酶终浓度1×预混液含有1 U/50 μL的聚合酶

          2)引物PCR反应体系中引物终浓度的范围为0.2-1 μM,推荐0.4 μM

          3)Mg2+dNTPs终浓度1×预混液含有2 mM Mg2+200 μMdNTPs

          4)不同模板的推荐使用量(25 μL反应体系):

      模板种类

      扩增片段1 kb-10 kb

      基因组DNA

      50 ng-200 ng

      质粒或病毒DNA

      10 pg-20 ng

      cDNA

      1-2.5 μL不超过PCR反应总体积的1/10

       

      PCR扩增程序

       

      有以下三种程序可选择,优先选择两步法程序。

      两步法程序(优先推荐):                                                                            三步法程序(常规程序):

      循环步骤

      温度

      时间

      循环数

       

      循环步骤

      温度

      时间

      循环数

      预变性

      98°C

      3 min

      1

       

      预变性a

      98°C

      3 min

      1

      变性

      98°C

      10 sec

      30-35

       

      变性

      98°C

      10 sec

      30-35

      延伸

      68°C

      30 sec/kb

       

      退火b

      60°C

      20 sec

      终延伸

      72°C

      5 min

      1

       

      延伸c

      72°C

      30 sec/kb

               

      终延伸

      72°C

      5 min

      1


      梯度温度退火程序(难扩增基因推荐程序):                                                           *不同扩增程序下的特点:

      步骤

      温度

      时间

      循环数

       

      程序类型

      两步法

      三步法

      梯度退火

      预变性

      98°C

      3 min

      1

       

      速度

      最快

      中等

      变性

      98°C

      10 sec

      15,每个循环降低1℃

       

      特异性

      中等

      梯度退火

      70-55°C

      20 sec

       

      PCR产量

      中等

      最高

      中等

      延伸

      72°C

      30 sec/kb

       

      检出率

      中等

      变性

      98°C

      10 sec

      20

         

      正常退火

      55°C

      20 sec

         

      延伸

      72°C

      30 sec/kb

         

      终延伸

      72°C

      5 min

      1

         

      【注】:

      a. 预变性温度和时间:推荐温度:98°C,时间:3 min,高GC含量模板5-10 min 
      b. 退火温度和时间:推荐温度:60°C,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec,可以在10-30 sec调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。

           c. 延伸温度和时间:推荐温度:72°C。时间:30 sec/kb,复杂模板根据实际情况可延长至60 sec/kb 

       

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      产品名称

      货号

      规格

      Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase 高保真DNA聚合酶

      10153ES60/76/80

      100 U/500 U/1000 U

      Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase 高保真DNA聚合酶

      10148ES60/76/80

      100 U/500 U/1000 U

      2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix 高保真酶预混液

      10149ES03/08

      1 mL/5×1 mL

      Hieff CloneTM Zero TOPO-Blunt Cloning Kit 零背景TOPO-Blunt平末端克隆试剂盒HOT

      10909ES20

      20 T

      Hieff CloneTM Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit 零背景TOPO-Blunt平末端克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点)

      10910ES20

      20 T

      Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit 一步法快速克隆试剂盒HOT

      10911ES20

      20 T

      Hieff Clone® Plus Multi One Step Cloning Kit 多片段一步法快速克隆试剂盒HOT

      10912ES10

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      Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit 定点突变试剂盒HOT

      11003ES10

      10 T

      Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit 多点突变试剂盒HOT

      11004ES10

      10 T

       

      HB211222

       

       

      温馨提示:不可用于临床治疗。

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    品牌商
    16 年 钻石会员
    翌圣生物科技(上海)股份有限公司
    • 联系人:

      翌圣生物

    • 所在地区:

      上海市浦东新区国际医学园区天雄路166弄1号楼3层南单元

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      体外诊断,耗材,技术服务,抗体,ELISA 试剂盒,细胞库 / 细胞培养,试剂

    • 经营模式:

      生产厂商

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