- ￥105 - 19995
- 翌圣生物（Yeasen）
- 10154ES
- 上海
- 2026年02月12日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量现货
- 英文名：
2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye)
- 保质期：
有效期1年
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
100 μL(10154ES01)/1mL(10154ES03)/5×1mL(10154ES08)/100×1mL(10154ES60)/100 mL(10154ES61)
| 规格： | 100 μL(10154ES01) | 产品价格： | ￥105.00 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 1mL(10154ES03) | 产品价格： | ￥585.00 |
| 规格： | 5×1mL(10154ES08) | 产品价格： | ￥1655.00 |
| 规格： | 100×1mL(10154ES60) | 产品价格： | ￥19995.00 |
| 规格： | 100 mL(10154ES61) | 产品价格： | ￥19995.00 |
2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye)是即用型2×预混合溶液，包含Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase，dNTPs以及优化的缓冲体系。预混液中添加了常温可抑制聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性的两种单克隆抗体，可简便地进行高特异性的Hot Start PCR。预混液中添加了延伸因子使得该酶具有长片段扩增能力，扩增目的片段的长度可长达13 kb，该酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性，其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍，是普通Pfu DNA聚合酶的9倍。适用于复杂模板的扩增，扩增产物为平末端。
2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye)具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，反应体系只需加入引物和模板即可，并可以通过两步法的程序进行扩增，简化了实验步骤，节省了时间。本产品中含有电泳指示染料，PCR产物可直接进行电泳。另外，该产品还含有特异保护剂，使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。
产品应用
基因克隆；复杂DNA模板扩增；高通量建库。
运输与保存方法
冰袋运输。-20°C保存。有效期1年。
注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！
推荐PCR反应体系
|
组分 |
体积 |
终浓度 |
|
ddH2O |
to 50 μL |
- |
|
DNA模板 |
适量 |
- |
|
Primer正向 (10 μM) |
2 μL |
0.4 μM |
|
Primer反向 (10 μM) |
2 μL |
0.4 μM |
|
2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye) |
25 μL |
1× |
【注】：1）聚合酶终浓度：在1×预混液含有1 U/50 μL的聚合酶。
2）引物：PCR反应体系中引物终浓度的范围为0.2-1 μM，推荐0.4 μM。
3）Mg2+、dNTPs终浓度：在1×预混液含有2 mM Mg2+和200 μM的dNTPs。
4）不同模板的推荐使用量（25 μL反应体系）：
|
模板种类 |
扩增片段1 kb-10 kb |
|
基因组DNA |
50 ng-200 ng |
|
质粒或病毒DNA |
10 pg-20 ng |
|
cDNA |
1-2.5 μL（不超过PCR反应总体积的1/10） |
PCR扩增程序
有以下三种程序可选择，优先选择两步法程序。
| 两步法程序（优先推荐）： | 三步法程序（常规程序）： | |||||||
|
循环步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
循环步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 | |
|
预变性 |
98°C |
3 min |
1 |
预变性a |
98°C |
3 min |
1 | |
|
变性 |
98°C |
10 sec |
30-35 |
变性 |
98°C |
10 sec |
30-35 | |
|
延伸 |
68°C |
30 sec/kb |
退火b |
60°C |
20 sec | |||
|
终延伸 |
72°C |
5 min |
1 |
延伸c |
72°C |
30 sec/kb | ||
|
终延伸 |
72°C |
5 min |
1 | |||||
| 梯度温度退火程序（难扩增基因推荐程序）: | *不同扩增程序下的特点： | |||||||
|
步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
程序类型 |
两步法 |
三步法 |
梯度退火 | |
|
预变性 |
98°C |
3 min |
1 |
速度 |
最快 |
中等 |
慢 | |
|
变性 |
98°C |
10 sec |
15，每个循环降低1℃ |
特异性 |
高 |
中等 |
高 | |
|
梯度退火 |
70-55°C |
20 sec |
PCR产量 |
中等 |
最高 |
中等 | ||
|
延伸 |
72°C |
30 sec/kb |
检出率 |
高 |
中等 |
高 | ||
|
变性 |
98°C |
10 sec |
20 | |||||
|
正常退火 |
55°C |
20 sec | ||||||
|
延伸 |
72°C |
30 sec/kb | ||||||
|
终延伸 |
72°C |
5 min |
1 | |||||
【注】：
a. 预变性温度和时间：推荐温度：98°C，时间：3 min，高GC含量模板5-10 min。
b. 退火温度和时间：推荐温度：60°C，也可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec，可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
c. 延伸温度和时间：推荐温度：72°C。时间：30 sec/kb，复杂模板根据实际情况可延长至60 sec/kb。
相关产品
|
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase 高保真DNA聚合酶 |
10153ES60/76/80 |
100 U/500 U/1000 U |
|
Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase 高保真DNA聚合酶 |
10148ES60/76/80 |
100 U/500 U/1000 U |
|
2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix 高保真酶预混液 |
10149ES03/08 |
1 mL/5×1 mL |
|
Hieff Clone Zero TOPO-Blunt Cloning Kit 零背景TOPO-Blunt平末端克隆试剂盒HOT |
10909ES20 |
20 T |
|
Hieff Clone Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit 零背景TOPO-Blunt平末端克隆试剂盒（不含MCS多克隆酶切位点） |
10910ES20 |
20 T |
|
Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit 一步法快速克隆试剂盒HOT |
10911ES20 |
20 T |
|
Hieff Clone® Plus Multi One Step Cloning Kit 多片段一步法快速克隆试剂盒HOT |
10912ES10 |
10 T |
|
Hieff Mut Site-Directed Mutagenesis Kit 定点突变试剂盒HOT |
11003ES10 |
10 T |
|
Hieff Mut Multi Site-Directed Mutagenesis Kit 多点突变试剂盒HOT |
11004ES10 |
10 T |
HB211222
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验[1] Zhao S, Zhang Y, Tan M, et al. Identification of YABBY Transcription Factors and Their Function in ABA and Salinity Response in Nelumbo nucifera. Plants (Basel). 2023;12(2):380.doi:10.3390/plants12020380(IF:4.658)
[2] Zhang Z, Liu X, Tao M, et al. Taxonomy, Phylogeny, Divergence Time Estimation, and Biogeography of the Family Pseudoplagiostomataceae (Ascomycota, Diaporthales). J Fungi (Basel). 2023;9(1):82. doi:10.3390/jof9010082(IF:5.724)
[3] Chen L, Xu ZL, Liu PG, et al. Identification of Three Viruses Infecting Mulberry Varieties. Viruses. 2022;14(11):2564. doi:10.3390/v14112564(IF:5.818)
[4] Wang W, Shinwari KI, Zhang H, et al. The bHLH Transcription Factor OsbHLH057 Regulates Iron Homeostasis in Rice. Int J Mol Sci. 2022;23(23):14869. doi:10.3390/ijms232314869(IF:6.208)
，切除标签，并通过质谱仪检测。如果你们实验室没有质谱仪，而又想开展多重分析，那么下面的一些方案可能适合你。 罗氏应用科学部的Light Cycler 480 Probes Master Mix能成功支持4重反应，甚至达到5重。这是一种即用型的反应预混液，包含了FastStart Taq 热启动型DNA聚合酶，它能减少非特异产物的形成，从而显著改善PCR的特异性和灵敏度。 Bio-Rad的iQ Multiplex Powermix能检测最多4个目标，即使它们的表达量相差106倍
PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
酶。 图 1.非特异性扩增（左图）与使用热启动 DNA 聚合酶进行的特异性扩增（右图）。 如何为您的 DNA 聚合酶选择正确的形式 还有更多需要考虑的因素。选择可以简化您工作流程的聚合酶形式。PCR 聚合酶形式的选择包括即用型预混液、用于直接凝胶上样的含染料缓冲液以及用于直接 PCR 分析的所有必要成分的完整试剂盒。 使用预混液，您只需添加模板和引物，然后，开始 PCR 实验。如果您想进一步减少操作步骤，使用含染料缓冲液的聚合酶允许 PCR 产物直接凝胶上样（注意：确保染料与下游应用兼容）。直接
-crack to help liberate the DNA. Check that the solution actually freezes. Overlay with a drop of mineral oil and incubate at 60°C for 60 minutes, followed by 95°C for 15 minutes. Cool to 4°C. Pipette 22.5 l of PCR master mix
