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- SAIOS（赛奥斯）
- 中国,武汉
- CL-086h
- 2026年01月28日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Human Prostate Cancer Cells
- 库存：
999
- 物种来源：
人
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 运输方式：
常温/干冰
- 规格：
1×10⁶cells
一.细胞介绍
人前列腺癌细胞LNCaP克隆FGC是从一位50岁白人男性(血型B+)的左锁骨淋巴结针刺活检中分离，该患者经确诊为前列腺癌转移。这株细胞对5-α-二氢睾酮(生长调节子和酸性磷酸脂酶产物)有响应。
二.细胞特性
（1）来源：前列腺；左锁骨淋巴结癌转移灶
（2）形态：上皮细胞样，轻微贴壁（细胞贴壁能力较弱，需使用特殊培养瓶）
（3）含量：>1x10⁶cells
（4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
（5）用途：仅供科研使用。
三.培养基及培养冻存条件准备
（1）准备：RPMI-1640 ; 优质胎牛血清10%; Glutamax（invitrogen 35050） 1%; Sodium pyruvate（invitrogen 11360070) 1 %; p/s 1%
（2）培养注意事项：
a. 需使用Corning的cellbind细胞培养瓶,货号是3289 。
b. 这株细胞并不形成一致的单层，而是形成集落。传代时如胰酶消化后细胞形成聚团，可以用滴管反复吹吸打碎。
c. 该细胞仅仅轻轻地吸附在基底上，不形成汇合，很快使培养基变酸。 生长很慢。 传代后48小时内不应扰动。
d. 细胞封包、寄出时，多数细胞从培养瓶底分离，悬浮在培养基中。 收到后，在通常培养单层细胞的条件下培养24到48小时，以使细胞再贴壁。 此后可以换上新鲜培养液。 如果需要，培养瓶内容物可以收集，300g离心15分钟，以适量培养液重悬并培养到一个单独的培养瓶中。
（3）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
（4）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
四.运输和保存
（1）冻存细胞：1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）复苏好的活细胞：T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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细胞接收后的处理：
（1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
（2）请在4或5x显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
（3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
（4）注意：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代。
细胞处理：
（1）冻存细胞的复苏：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8mL完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
（2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4mL含10%FBS的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8mL按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
（3）细胞冻存：收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面以T25瓶为例：
（1）细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL。
（2）1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1mL冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
（3）将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80℃冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存，同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
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文献和实验Carroll A.G., Voeller H.J., Sugars L., Gelmann E.P.
p53 oncogene mutations in three human prostate cancer cell lines.
Prostate 23:123-134(1993)
该词来源于希腊文的 Kλωγ，原义为小枝之集聚，但后来则指由无性繁殖所产生的同基因型的生物群，这是于 1903年由 H． J． Webber最早应用于生物学上的。过去曾译作具有繁殖意思的营养系或含有原语源意思的分支系（群），而现在则多按其原音直接称为克隆。现在该词在个体、细胞和基因等三方面都使用，而且任何一方面似乎都意味着来自同源的犹如复制一样的同一生物群体。（ 1）关于个体：由无性繁殖所增殖的种群均是克隆，这在植物方面，通过体细胞培养，在试管内繁殖、分化可以重新生出完整
在伯内特（F． M． Burnet）关于免疫的无性繁殖系选择学说中，对自身构成物质有发生免疫反应可能的某淋巴系细胞群，称为禁忌细胞株。禁忌细胞株虽依靠对自身的免疫耐受性而制止活动；但可以假定那种抑制机理一失败，那些细胞就对自身发生免疫反应，而出现自身免疫病。
miR-370的高表达通过下调转录因子FOXO1的表达诱导前列腺癌细胞增殖
，它作为一种肿瘤抑制因子与各种关键的细胞功能有关，包括细胞生长、细胞的分化、细胞凋亡以及血管生成。所以，令人迷惑的是FOXO蛋白为何在肿瘤细胞中低表达。microRNA是一种非编码的含有20~22个核苷酸的单链RNA，它可以使靶基因的转录受到抑制，沉默或降解靶基因，对调控基因的表达起到极大的作用。最近的研究发现，在5种前列腺癌细胞系中miR-370比正常的前列腺上皮细胞显著高表达。miR-370的异常表达诱导前列腺癌细胞DU145和LNCaP的增殖，并促进细胞的非依赖型锚定增长和细胞克隆的形成；相反抑制细胞
