相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
KLE
- 库存:
999
- 供应商:
武汉赛奥斯生物
- 物种来源:
人
- 细胞形态:
上皮样
- 运输方式:
常温/干冰
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
1×10⁶cells
一.细胞介绍
KLE细胞是源自一名64岁白人女性的子宫内膜肿瘤组织,由G·R·Richardson于1984年建系。KLE细胞染色体为非整倍体,数目范围在51-66之间。KLE细胞裸鼠植瘤后,其肿瘤标本在电镜下显示,细胞间见紧密相连,细胞表面具有微绒毛。KLE细胞形态特征与孕激素刺激后的子宫内膜相似。
二.细胞特性
(1)来源:女 64 子宫;子宫内膜
(2)形态:上皮样 贴壁生长
(3)含量:>1x10⁶cells
(4)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
(5)用途:仅供科研使用。
三.培养基及培养冻存条件准备
(1) 准备DMEM/F-12培养基;优质胎牛血清,10%;双抗1%。
(2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
(3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
四.运输和保存
(1)冻存细胞:1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)复苏好的活细胞:T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
_ueditor_page_break_tag_
细胞接收后的处理:
(1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
(2)请在4或5x显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
(3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
(4)注意:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代。
细胞处理:
(1)冻存细胞的复苏:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8mL完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
(2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4mL含10%FBS的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8mL按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
(3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面以T25瓶为例:
(1)细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL。
(2)1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞,按每1mL冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
(3)将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80℃冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存,同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| CL-067e | HaK 仓鼠肾上皮细胞 |
| CL-068e | Fc3Tg 猫舌胚胎成纤维细胞 |
| CL-070e | BS-C-1 非洲绿猴肾细胞 |
| CL-071e | RK13 兔肾细胞 |
| CL-072e | IBRS-2 猪肾传代细胞 |
| CL-073e | LEC2 仓鼠卵巢细胞 |
| CL-074e | BEND 牛子宫内膜上皮细胞 |
| CL-075e | Super Tube 狗肾细胞 |
| CL-076e | Mv1Lu 貂肺上皮细胞 |
| CL-077e | OK 负鼠肾细胞 |
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验Richardson G.S., Dickersin G.R., Atkins L., MacLaughlin D.T., Raam S., Merk L.P., Bradley F.M.
KLE: a cell line with defective estrogen receptor derived from undifferentiated endometrial cancer.
Gynecol. Oncol. 17:213-230(1984)
Science:直击肿瘤命门,Shibin Zhou 等开发靶向 TP53 突变的双特异性抗体
靶向 TP53 突变和 CD3 的双特异性单链抗体(scDb)。 研究人员首先确证了 p53R175H 在三种人肿瘤细胞系(KMS26, TYK-nu, KLE)中表达,并以 p53R175H/HLA-A*02:01 复合物的形式被呈递到细胞表面。通过噬菌体文库技术筛选得到了两个特异性靶向 p53R175H/HLA-A*02:01 复合物的抗体克隆,分别命名为 H2-scDb 和 H20-scDb。这两个克隆可以特异性地与 p53R175H/HLA-A*02:01 复合物结合,并激活 T 细胞
肿瘤的出现:比如双侧乳腺癌,双侧肾癌,双侧视网膜母细胞瘤。 多个原发性肿瘤在同一个病人身上出现:如一个患者既有原发性肠癌,又有原发性卵巢癌。 非肿瘤临床表现的出现:如Cowden综合征,该疾病是一种罕见的常染色体显性遗传病,主要表现为多重错构瘤及某类肿瘤发生风险的增加。临床表现多种多样,包括乳腺癌、子宫内膜癌、甲状腺癌等,皮肤方面表现为口腔及皮肤乳头状瘤,胃肠方面表现为混合性息肉(包括错构瘤)。 无外环境风险因素的发现:一般我们认为肿瘤是复杂疾病,肿瘤的发生是遗传因素与环境因素(包括
【讲座】精品文献讲座第一讲---三苯氧胺在子宫内膜癌的调节机制
雌激素相关靶基因的表达,而且调控一系列独特的基因表达,进而发现PAX2基因在介导雌激素和三苯氧胺刺激的子宫内膜细胞的增殖和癌变过程中起着关键作用。此外,他们还发现PAX2只在子宫内膜癌细胞中被雌激素和三苯氧胺激活表达,而在正常的子宫内膜上皮细胞中则不能被雌激素和三苯氧胺激活,这种差异是由于与癌症相关的PAX2基因启动子低甲基化造成的。 实验设计(括号内为实验的意义和感想): 1. 确定基因芯片处理时间 子宫内膜癌上皮细胞Ⅰ期,Ⅱ期分别原代培养 预实验3小时产生最大量的雌激素受体的靶基因







