人角膜上皮细胞（HCEC）

一.细胞描述

角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不同，中央部最薄。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。

角膜上皮细胞的体外培养对研究角膜的生理学、病理学、免疫学以及分子生物学都是极为重要的手段，常用于研究细胞代谢产物、病毒感染、各种生长因子和药物对细胞生长的影响。

二.细胞特性

(1)组织来源于人正常眼组织。

(2)细胞鉴定：广谱角蛋白（PCK）免疫荧光染色为阳性。

(3)经鉴定细胞纯度高于90%。

(4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

(5)细胞生长方式：上皮样细胞，不规则细胞，贴壁培养。

三.细胞运输和保存

视气温状况、运输距离，客户与公司协商后选择下述一种运输方式：

(1)T25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输。收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

(2)1ML冻存细胞悬液装于1.8ML的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输。收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

四.推荐培养基

人原代角膜上皮细胞的体外培养周期有限。建议使用本公司配套的原代细胞专用培养基和正确的培养方法来解冻、传代，以此保证细胞具备良好的增殖和分化能力。推荐使用：原代上皮细胞培养基（Cat.#:PM-001）。

五.产品用途

本产品只提供给进一步的科研使用，不可应用于治疗等其他方面。

   

细胞接收后的处理：
（1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
（2）请在4或5x显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
（3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
（4）注意：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照细胞培养条件说明新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代。