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pET-28a(+)
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武汉华尔纳生物科技有限公司
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Product Introduction
| 品牌 |
华纳生物 | ||||||||||||||||||||||||||
| 货号 |
WN-12937 | ||||||||||||||||||||||||||
| 规格 |
2ug | ||||||||||||||||||||||||||
| 价格 |
询价 | ||||||||||||||||||||||||||
| 货期 |
现货 | ||||||||||||||||||||||||||
订购信息
质粒图谱![]() 载体描述The pET-28a-c(+) vectors carry an N-terminal His•Tag®/ thrombin/ T7•Tag® configuration plus an optional C-terminal His•Tag sequence. Unique sites are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circular map. The cloning/expression region of the coding strand transcribed by T7 RNA polymeraseis shown below. The f1 origin is oriented so that infection with helper phage will produce virions containing single-stranded DNA that corresponds to the coding strand. Therefore, single stranded sequencing should be performed using the T7 terminator primer (Cat. No. 69337-3). |
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武汉华尔纳生物科技有限公司,简称华尔纳生物(Warner Bio),坐 落于武汉生物产业基地·光谷生物城,是一家生物医学资源开发,科研生 产,产品销售集一体的科技型企业。
华尔纳生物(Warner Bio)始终专注于生命科学领域及细胞实验培养 方向,坚持为客户打造优质高效,安全可靠的生命科学产品,我们始终坚 持于以客户为中心、以品质求生存、以价值求发展、以服务求口碑的企业 理念,从而获得全国广大科研用户的一致认可。
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文献和实验表达载体的构建是生物技术和所需蛋白质产生的基本工具,本文总结了pET-32α(+)载体技术的构建,该技术通常用于研究实验室。该方法包括获得用于构建载体的外源DNA片段,将DNA片段亚克隆到pET-32α(+)表达载体中,在大肠杆菌 BL21(DE3)中进行蛋白质表达以及在大肠杆菌中在天然条件下进行蛋白质纯化。裂解液。介绍作为分子生物学实验室中非常有用的实践,重组DNA技术(或基因克隆)是指将DNA片段从一种生物体转移到自我复制的遗传元件如表达载体。然后插入的DNA可以在外源宿主细胞中繁殖
相关专题 1)噬菌体DE3溶源化的菌株如BL21(DE3)是最常用的表达菌株,噬菌体DE3是λ噬菌体的衍生株,构建好的表达载体 可以直接转入表达菌株中,诱导蛋白的表达方式与lac启动子一样都是IPTG诱导。 2)表达菌株BL21(DE3)上带有lacI基因,T7 RNA 聚合酶编码基因以及lacUV5启动子,lacUV5启动子可以启动T7 RNA 聚合酶的表达; 3)表达质粒 如pET-28质粒带有T7启动子和编码阻遏
dmdfe 本人将GFP基因后面加了一段大约110bp的序列,插入PET28A的BamH1和Hind3位点,最后在BL21中表达。 经SDS-PAGE验证表明: 目的蛋白 大量存在菌体裂解后沉淀即包涵体中,但是该沉淀无色。 少量存在于上清中,上清显微弱的绿色。 看文献大量报道GFP融合蛋白几乎都形成可溶性表达,目的蛋白在上清中,并且诱导条件没有太大要求。 想请教一下各位做过GFP原核表达的经验
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