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文献和实验of a 10% gel 4 ml H2O 3.3ml 30% acrylamide/bisacrylamide (29:1 mix) 2.5 ml1.5M Tris(PH 8.8) 10% SDS 100 µl 10% ammonium persulfate 100 µl TEMED 8 µl 2. Stacking gel: 4 ml 2.7ml water 1 ml 0.67ml 30% acrylamide/bisacrylamide (29:1 mix) 0.ml 1.0M
at 4°CEthidium bromide solution (20 mg/ml in H2O) (for duplex PCR only; see Steps 40-53)Forward and reverse primers (100 µM stock solutions in H2O)For duplex PCR (Steps 40-53), primers should be designed in order to obtain comparable amplifications
Polymerase III in vitro Transcription
50 ug/ml BSA 2.5 ul 100 mg/ml BSA H2O to 5 ml total volume 20 ml
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