- ￥1896
- 博尔森生物
- BES2105PCR
- 中国/上海
- 2025年12月24日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
48T
沙门氏菌核酸检测试剂盒（恒温荧光法）
产品说明：
产品组成（48测试）
| 试剂 | 含量 |
| A-Sal-I | 1200μL × 1 支 |
| B-I | 55μL × 1 支 |
| C-I | 1200μL × 1 支 |
| NG-I | 50μL × 2 支 |
| PG-Sal-I | 50μL × 1 支 |
适用仪器：
CFX 96 等荧光 PCR 仪。
自备耗材和仪器：
100-1000μL）及配套灭菌吸头；⑤离心机；⑥涡旋混匀器；⑦金属浴
注意事项：
1）第一区：试剂准备区。
2）第二区：样本制备区。
3）第三区：模板添加区。
4）第四区：扩增及产物分析区。
分区之间最好进行物理性隔离，避免人为因素造成的污染。
2．实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。
3．严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
4．反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 30
秒，并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。
5．反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。
6．不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。
7. 检出限为 103 CFU/ml 是以 1 ml 103 CFU/ml 增菌液离心后收集菌体再提取的细菌基因组 DNA 作为模板。
样品处理：
对样品进行前增菌，制备的菌液保存待用。
称取 25 g（ml）样品放入盛有 225 mL BPW 的无菌均质杯中，以 8000 rpm/min～10000 rpm/min 均质 1 min～2
min，或置于盛有 225ml BPW 的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打 1 min～2 min。若样品为液态，不需要均质，
振荡混匀。如需测定 pH 值，用 1 mol/ml 无菌 NaOH 或 HCl 调 pH 至 6.8 ± 0.2。无菌操作将样品转至 500 ml
锥形瓶中，如使用均质袋，可直接进行培养，于 36 °C±1 °C培养 8 h～18 h。
如为冷冻产品，应在 45 °C以下不超过 15 min，或 2 °C～5 °C不超过 18 h 解冻。
详细步骤请按照标准操作或查阅食安通软件。
实验操作：
1. 试剂配制（试剂准备区，放置于冰盒中进行）：
若有 N 个待检样品，则参照下表，按照 N+2 个数量计算各组分用量（N 个待检样品+1 个阴性对照+1 个阳性
对照），将反应液置于 0.6ml 或者 1.5ml 离心管中，涡旋混匀，离心 30 秒，分装于 0.2ml PCR 管中，并向每管加入 1
滴 C-I（约 20μl）。
|
试剂
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使用量
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A-Sal-I
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22×(N+2)μL
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B-I
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1×(N+2)μL
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反应液总体积
|
23×(N+2)μL
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2．模板制备（样本制备区）
建议使用试剂配套细菌组 DNA 提取系列产品，具体过程详见产品说明书。
3．添加模板（模板添加区，放置于冰盒中进行）
在步骤 1 中已含有反应液的 PCR 管中加入 2μl 模板，顺序为 NG-I、待测样品模板、PG-Sal-I。涡旋混匀 30s，
离心 1min，立即进行扩增反应。
4. 扩增反应（扩增及产物分析区）
①恒温仪器 63°C条件下反应 30 min。
②若使用荧光定量 PCR 仪，则荧光基团选择 FAM，淬灭基团选择 None，将 63°C 15 s，63°C 45 s 作为一个
循环，于 63°C 45 s 处收集荧光信号，30 个循环。
结果判定：
量低于检测限。
②在荧光定量 PCR 仪上，根据有无“S”型扩增曲线判定结果。若有“S”型扩增曲线，则样品中含有沙门氏菌；若
无“S”型扩增曲线，则样品中不含有沙门氏菌或含量低于检测限。
术支持人员联系。
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