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文献和实验体外培养模型已被广泛应用于血脑屏障的研究、脑血管疾病的病理生理及分子生物学研究、新药筛选、脑微血管内皮细胞生理生化及药理学研究等领域。而大多数体内实验采用大鼠为动物模型,而且大鼠具有较多的细胞生物学研究所需的抗体可用,因此进行大鼠脑微血管内皮细胞的培养具有重要的意义。自从Panula等[2]首次成功培养大鼠脑微血管内皮细胞以来,国内外有关大鼠脑微血管内皮细胞的分离和培养方法已有较多的报道,我们发现国内的方法多以组织匀浆、两次尼龙网过滤分离脑微血管段为主[3,4],也有采用酶消化、梯度离心及尼龙网过滤
【摘 要】目的:培养脑皮质微血管内皮细胞。方法:取1~5d Wistar乳鼠脑皮质,经不同孔径的筛网过滤后,用胶原酶振荡消化获得的微血管内皮细胞进行培养,用Ⅷ因子相关抗原免疫组化鉴定。结果:培养的细胞呈单层贴壁生长,7~9d呈典型的铺路卵石样征象。结论:建立了一种简便易行的培养脑皮质微血管内皮细胞的方法。【关键词】 细胞培养;微血管内皮细胞;Wistar大鼠脑微血管内皮细胞是构成血脑屏障的主要成分,具有特殊的形态结构和机能,在许多病理状态下起重要作用[1]。建立脑微血管内皮细胞体外培养,可获
抗人CD105单克隆抗体(NeoMarkers),兔抗人CD34、CD31多克隆抗体(Antibody Diagnostica Inc),兔抗人vW因子多克隆抗体(华美公司),抗兔及抗鼠ABC试剂盒、DAB显色试剂盒为华美公司产品,其他试剂均为国产分析纯以上级别。 3、方法: 植块法原代细胞培养: 细胞培养瓶的处理:选用50ml玻璃培养瓶,高压蒸汽灭菌,瓶底铺自制鼠尾胶(制作方法参见2),移入80℃烤箱烤干,临用前用消毒D-Hanks平衡盐缓冲液冲洗3次
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