滑膜成纤维细胞_大鼠原代细胞

人类滑膜原代细胞培养

1、将切下的组织在手术台上请护士将标本放入低温生理盐水中（可不要动它），在手术完成时将标本放入PBS冰水液中并放入消毒的容器中带回实验室；2、在超净台中将标本放入培养皿中，加入α-MEM洗涤；3、获得组织切开，仔细辨认于关节反折处及增生的白色光滑的滑膜组织，附于关节软骨面的增生的血管翳也为滑膜组织（可作另一管消化），仔细剔除脂肪组织，用α-MEM洗二次（以去除红细胞），放在小青瓶中用解剖剪锐性切碎4、用双倍获得组织的体积含有4mg/mlⅠ型胶原酶的α-MEM消化37℃孵育120分钟（在此期间

大鼠肺成纤维细胞培养

瓶倾斜放置在温箱中，干贴壁2-4 h后，将培养瓶慢慢翻转平放，继续静置培养。注意上述操作过程中动作要轻柔，让液体慢慢覆盖组织小块，严禁动作过快致使液体产生的冲力使粘贴的组织块漂起而造成原代培养失败。48 h后换液，更换2-3 ml即可。 2.6 贴块贴壁72 h后，镜下可见大量的成纤维细胞爬出，将组织块去除，继续培养2-3天，待细胞长满，即可传代。注：因为血清浓度低，内皮细胞可以爬出少量，但是很快就会死掉。 2.7 传代用0.25%胰酶常规消化，以1:2传代，传代完后，采用

胶原诱导性关节炎大鼠滑膜双向凝胶电泳图谱建立及差异分析

[摘要] 目的：类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis，RA）是一个多基因多因素参与的病理过程。实验中通过建立与RA发病机制相似的胶原诱导性关节炎（Collagen-induced arthritis，CIA）大鼠动物模型，运用蛋白质组技术对正常大鼠和CIA大鼠模型不同时间点滑膜组织的蛋白质点进行比较分析，为鉴定CIA大鼠滑膜病变相关蛋白质及研究RA发病机制奠定基础。方法：用牛Ⅱ型胶原和完全福氏佐剂建立CIA大鼠模型，采用一步抽提法抽提滑膜蛋白质，运用固相pH梯度双向