- ￥1904 - 3088
- 攸碧艾/YOBIBIO
- U33-300-B
- YOBIBIO
- 2026年04月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
99
- 英文名：
/
- CAS号：
/
- 保质期：
1年
- 供应商：
攸碧艾生物
- 保存条件：
2-8°C
- 规格：
0.75ml/1.5ml
| 规格： | 0.75ml | 产品价格： | ￥1904.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 1.5ml | 产品价格： | ￥3088.0 |
UBI转染试剂U-300 Transfection Reagent
产品介绍:
UBI转染试剂U-300 （U-300 Transfection Reagent）是在前几代转染试剂基础上，再次创新包含最为先进的脂质体纳米颗粒技术，追求更卓越的转染性能，此试剂具有优异的转染效率，并可提高细胞活性，广泛适用于难转染的及常见的细胞种类（例如HEK 293和Hela细胞）。
产品特点：
提供卓越的性能，以针对难转染的细胞系实现了较高转染效率的试剂
转染试剂对细胞作用温和，毒性很低
相比其他转染试剂具有更高的转染效率和更低的用量 适用细胞更加广泛，有效转染难于转染的细胞系
能有效转染的细胞类型包括：
肺癌细胞（A549、NCI-H460）骨肉瘤细胞（U-2 OS、Saos-2）
结肠癌细胞（Caco2、SW480）胰腺癌细胞（PANC-1）
皮肤黑色素瘤细胞（SK-MEL-28）成纤维细胞（3T3、COS-7）
肝细胞（HepG2、HuH7）红白血病细胞（K562）
乳腺癌（MCF7、Hs578T）前列腺癌（LNCap）
成肌细胞（C2C12、L6 CRL-1458）
储存事项:
冰袋或者湿冰运输，短时间内可室温运输，但需避免光源热源。
长时间储存于 4℃，切勿冻存，有效期24个月。
产品用于：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。
警告！产品对人体危害性未知，请遵循操作说明。穿戴适当的防护眼镜、衣服和手套！如果不小心接触，应立即用大量的水冲洗，如引起身体不适应前往医院治疗。
注意事项: 转染siRNA至细胞时，遵循如上所述的DNA实验方案，但在稀释siRNA 时不要加入 B-300试剂。在无血清培养基中制备 DNA-U33-300复合物，直接将其加入含细胞培养基的细胞中。(有血清或抗生素均可 ） 转染后无需去除转染复合物或者更换/添加培养。 整个实验过程避免细胞污染，由于不同细胞耐受性不同，我们建议您在做批量实验前，可根据实际质粒和细胞的转染效率，分不同梯度量先做预实验，摸索最佳DNA和U33-300 Transfection Reagent的混合比例。步骤里面测试推荐的两种浓度的并非固定浓度，优化后可根据自身细胞情况调整用量。
操作步骤
（以六孔板的贴壁细胞DNA转染为例) 细胞准备。转染前一天将细胞接种至六孔板内，细胞接种数量视其生长速度和细 6 胞系类型而定，一般为0.5-1×10 个细胞。转染时要求细胞生长的汇合度为70~90%，转染前两小时对细胞进行换液。(细胞状态与转染效果影响很大，选择最佳的细胞状态更有利于转染效率提高和转染后细胞状态的恢复） 将3.75 μl和7.5 μl 的U33-300分别加至另外125 μl无血清的OPTI-MEM培 养基中，轻轻混匀，室温静置2-3分钟。 将5 ug 质粒DNA (0.5-5μg/μL) 加入到250μl无血清OPTI-MEM培养基稀释，制 DNA 预混液匀，然后添加10 ul B300 试剂并充分混匀。
4.在每管已稀释的U-300试剂中加入等体积稀释的 DNA孵育10-15分钟。
5.将DNA和U33-300混合液滴加至六孔板的孔内，前后左右晃动孔板混匀，置于培养箱中培养。
6.转染18-48小时后，倒置荧光显微镜下观察荧光蛋白表达，或加入抗性培养基筛选稳定表达细胞系单克隆。
用量参照表：
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文献和实验的结合和解链），无反向重复序列（有利于减小siRNA的有效作用浓度，提高siRNA干扰效率），正义链碱基的偏爱性A19（正义链中第19位碱基为A，如下表示类同）；A3；U10；无G/C(正义链中第19位碱基不为G或C)；无G13。依此规则，Reynolds等设计的30条siRNA中有29条是有效的。Kumiko等亦认为siRNA反义链5’端为A/U（即有义链U/A）19和最后7个碱基中有5个A/U，会有助于RNAi的高效发挥，且正义链G/C1和序列中无连续9nt以上的GC重复片段与基因沉默效率呈显著
选择理想的方法，必须具有高转染效率、低血细胞毒性、对正常生理学的影响最小，且使用简单、可重复。 接下来我们就来看看最常用的基因输送技术——阳离子脂质体介导的基因输送 阳离子脂质体介导的输送是一种快速、简单且重复性好的方法，可方便地将 DNA、RNA、siRNA 或寡核苷酸转入真核细胞内。它可对多种细胞类型实现高效转染，包括贴壁细胞、悬浮细胞、昆虫细胞和原代培养细胞。 阳离子脂质体介导的转染的优势在于能够高效地转染各种细胞系，适用于高通量筛选，且能够导入各种大小的 DNA、RNA 和蛋白
方法。 脂质体型转染 一、注意事项 1. 转染试剂的用量 2. siRNA（小干扰RNA）的用量 3. 转染时的细胞密度 4. 转染时的操作顺序 5. 细胞与转染试剂 /siRNA（小干扰RNA）复合物的温浴的时间 二、转染步骤 选用生理状态良好的细胞对提高转染效率很重要. siRNA和脂质体的用量和两者的比例可在推荐范围内适当调整。 1. 转染前一天， 将细胞接种在 6孔板上，24小时贴壁后细胞密度达到70%-90%； 2. 转染前，用基础培养基opti
