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- 2025年12月23日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
人胰腺肿瘤成纤维细胞永生化
- 细胞类型：
人胰腺肿瘤成纤维细胞永生化
- 肿瘤类型：
/
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 库存：
100
- 英文名：
Immortalization Immortalization of human pancreatic tumor fibroblastsof human pancreatic tumor fibroblasts
- 生长状态：
贴壁生长
- 年限：
永久
- 运输方式：
快递形式
- 器官来源：
人胰腺肿瘤成纤维细胞永生化
- 是否是肿瘤细胞：
/
- 细胞形态：
正常
- 免疫类型：
/
- 物种来源：
人胰腺肿瘤成纤维细胞永生化
- 相关疾病：
/
- 组织来源：
人胰腺肿瘤成纤维细胞永生化
- 规格：
5*10^5
细胞中文名称：人胰腺肿瘤成纤维细胞永生化
细胞英文名称：Immortalization Immortalization of human pancreatic tumor fibroblastsof human pancreatic tumor fibroblasts
形态特性：
生长特性：贴壁培养
细胞特性
1)组织来源于实验动物的正常肺组织。
2)细胞鉴定：纤维连接蛋白（Fibronectin）免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
1、 细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃， 5%CO2 细胞
培养箱中培养；
2、 细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）用适量的冻存液（FBS： DMSO=9 ： 1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜， 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结
晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀用 6ml 完全培养基重悬，接种 25cm2 培养瓶，于 37℃， 5%CO2 细胞培养箱中培养
人胰腺肿瘤成纤维细胞永生化收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液移入废液缸中，悬浮细胞需离心处理，加入6ml新鲜完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤说明书。
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文献和实验为了逃避免疫攻击，癌细胞又出新招！Cancer Cell 发现连胶原蛋白也「叛变」了……
蛋白 I 型胶原蛋白是体内最丰富的蛋白质，由成纤维细胞产生，主要存在于骨骼、肌腱和皮肤中。在其正常形式中，胶原蛋白是由两条 α1 链（Col1a1）和一条 α2 链（Col1a2）组成的异源三聚体，它们组装形成三螺旋结构，作为细胞外基质的一部分。然而，在研究人类胰腺癌细胞系时，研究人员发现这些细胞会产生非典型形式的胶原蛋白。 他们发现这些细胞仅表达编码 α1 链的基因（Col1a1），而成纤维细胞则同时表达这两种基因。进一步分析表明，癌细胞通过表观遗传高甲基化使编码 α2 的基因（Col1a2）沉默
人类组织正常及永生化细胞293E E转化人胚肾293细胞(B类)293ET ET转化人胚肾293细胞(B类)293KB KB转化人胚肾293细胞(B类)293T 人胚肾T细胞A7d 野生型人C-KIT受体细胞株(B类)AMS3(SCF3) 人干细胞因子单克隆抗体细胞株(B类)APP-PS1 人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293)(B类)FC33 ASP2 人胚胎肾细胞转化细胞(B类)FIP293 FIP293(来源于HEK293)(B类)HEK-293 人胚
心得如下： 1、 GES长的非常快，而且比较大，呈成纤维细胞样，细胞长得越好，铺的越开。 2、传代一般1：3传，每3天需要再传。 2、永生化细胞，不要等细胞100%汇合再传代，多次这样细胞容易球形增加，还不容易洗掉。 3、用胰酶（0.25%）--EDTA（0.01%）混合消化液消化好些，一般1分钟左右呈球形，即可混悬细胞了。 4、培养液用10%小牛血清的DMEM或1640都可以。 步骤： 吸净培养液，胰酶洗1次，倒尽，加胰酶消化液置于37度，在显微镜下注意观察，细胞变圆后，倒掉
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