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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
外周血单个核细胞
- 细胞类型：
外周血单个核细胞
- 肿瘤类型：
/
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 库存：
100
- 英文名：
Peripheral Blood Mononuclear Cells
- 生长状态：
贴壁生长
- 年限：
永久
- 运输方式：
快递形式
- 器官来源：
外周血单个核细胞
- 是否是肿瘤细胞：
/
- 细胞形态：
正常
- 免疫类型：
/
- 物种来源：
外周血单个核细胞
- 相关疾病：
/
- 组织来源：
外周血单个核细胞
- 规格：
5*10^5
PBMC（peripheral blood mononuclear cell），外周血单个核细胞，顾名思义，其主要细胞类型为血液里边具有单个核的细胞，主要包括淋巴细胞（T cell＼B cell），单核细胞，巨噬细胞，树突状细胞和其他少量细胞类型。其中淋巴细胞占很大一部分。体外检测淋巴细胞首先要分离外周血单个核细胞。
细胞英文名称：Peripheral Blood Mononuclear Cells
形态特性：多角形细胞
生长特性：贴壁培养
细胞特性
1)细胞来源于人外周血。
2)细胞鉴定：PBMC是混合体系，故无法进行纯度鉴定，流式细胞仪检测的细胞表型分布如下表：（图表中为平均百分比，不同个体的表型分布有差异）
| 细胞表型 | 平均阳性百分比 |
| CD34 | 0.20% |
| CD3 | 70.70% |
| CD4 | 38.90% |
| CD8 | 24.50% |
| CD16 | 18.20% |
| CD19 | 10.60% |
| CD56 | 12.40% |
3)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
4)细胞生长方式：细胞是混合体系，少量贴壁生长，大部分悬浮生长。
1、 细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃， 5%CO2 细胞
培养箱中培养；
2、 细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）用适量的冻存液（FBS： DMSO=9 ： 1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜， 24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结
晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；
3）弃上清，沉淀用 6ml 完全培养基重悬，接种 25cm2 培养瓶，于 37℃， 5%CO2 细胞培养箱中培养
外周血单个核细胞收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液移入废液缸中，悬浮细胞需离心处理，加入6ml新鲜完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤说明书。
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文献和实验外周血单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell，PBMC），是指外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞（Lymphocyte）、单核细胞（Monocyte）、树突状细胞（DC）和其他少量细胞。 1 原理 单个核细胞的体积、形态和比重与外周血其它细胞不同，红细胞和多核白细胞的比重超过1.080，单个核细胞的比重为1.070左右，血小板为1.030左右。因此，可利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异将各种血细胞与单个
正常人外周血中的干/祖细胞的含量占有核细胞数的1%左右，经有效动员后，骨髓中的造血干细胞会释放到外周血中，使外周血中的干/祖细胞比例明显增高。动员外周血是指用有效的动员剂对供者进行动员后采集的外周血。重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）是外周血动员最常用的动员剂，它可选择性的作用于粒系造血祖细胞，促进其增殖、分化，并可增加外周血中性粒细胞的数目和功能。动员外周血单个核细胞是采集经动员后的健康供者的外周血，采用密度梯度离心的方法提取其单个核细胞，其各亚型细胞的数量、细胞免疫表型、分泌
Ficoll：一种已灭菌的，特定密度的密度梯度离心介质。被广泛用作从外周血、骨髓及脐带血中分离高活性的单个核细胞。 Ficoll-Paque溶液包含： Ficoll PM400：由高分子量蔗糖（Mr 400K）聚合物与表氯醇聚合合成(凝集红细胞) 泛影酸钠：使溶液在低粘度下具有高密度 EDTA二钠钙 Ficoll的保存：开盖前保存在4℃~30℃（避光），开盖后保存在 4℃~8℃（避光） Ficoll 产品细分如下： 使用Ficoll (1.077g/ml) 分离人外周血单个核细胞
